低氧条件下Akt抑制剂MK-2206增强胰腺癌细胞对吉西他滨敏感性的作用研究

摘要

目的研究低氧条件下Akt抑制剂MK-2206与吉西他滨联用后对胰腺癌吉西他滨敏感性的影响。方法通过物理低氧方法在体外建立胰腺癌细胞低氧模型。将胰腺癌细胞系置于低氧条件下(氧气浓度1%)培养48 h,以常氧条件下培养(氧气浓度21%)的细胞作为对照,使用Western blot检测低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、p-Akt(Ser473)及Akt蛋白表达改变。使用Western blot检测在常氧和低氧条件下MK-2206处理胰腺癌细胞(MIA PaCa-2和BxPC-3)后p-Akt(Ser473)蛋白的表达改变;使用CCK-8细胞毒性实验探讨低氧条件下MK-2206对胰腺癌细胞系(MIA PaCa-2和BxPC-3)吉西他滨敏感性的影响。结果Western blot结果显示,与常氧组细胞相比,低氧条件下胰腺癌细胞HIF-1α蛋白和p-Akt(Ser473)蛋白表达水平升高。常氧和低氧条件下MK-2206能有效抑制MIA PaCa-2和BxPC-3细胞p-Akt(Ser473)的表达。细胞毒性实验结果显示低氧条件下MIA PaCa-2细胞MK-2206(1μmol/L)与吉西他滨(10μmol/L)联用组细胞活力低于DMSO与吉西他滨(10μmol/L)联用组,差异有统计学意义(t=12.107,P=0.007);BxPC-3细胞MK-2206(1μmol/L)与吉西他滨(10μmol/L)联用组细胞活力低于DMSO与吉西他滨(10μmol/L)联用组,差异有统计学意义(t=5.363,P=0.033)。结论低氧条件下MK-2206能有效增强胰腺癌吉西他滨敏感性。