二种多管水母光蛋白基因的分离、表达及生物活性初步研究

摘要

分别从厦门东海域的大型多管水母和细小多管水母中分离到了新的光蛋白基因aeqxm和aeqxxm,并在大肠杆菌中进行了表达.aeqxm和aeqxxm DNA序列的编码区总长均为585 bp,无内含子序列,推导的氨基酸序列总长均为195个氨基酸.aeqxm,aeqxxm DNA和AEVAQ440X cDNA之间的核苷酸序列同源性分别为80.7%,85.1%,aeqxm和aeqxxm DNA的核苷酸序列同源性为87.2%.原光蛋白apoaeqxrn,apoaeqxxm与AEVAQ440X编码的氨基酸序列之间的同源性分别为84.7%,84.2%,apoaeqxm和apoaeqxxm的氨基酸序列之间的同源性为94.4%.分别将aeqxm和aeqxxm基因克隆至pTO-T7表达载体,apoaeqxm,apoaeqxxm在大肠杆菌中的表达量都达到40%左右.取菌体超声上清与腔肠动物荧光素f、巯基乙醇混合再生后,加入CaCl2,用荧光全谱仪检测到470 nm处的瞬时发光,表明表达的apoaeqxm,apoaeqxxm具有正常的生物学功能.