辐射过程中耐辐射奇球菌蛋白酶变化的检测与分析

摘要

采用明胶和酪蛋白底物酶谱法以及荧光酪蛋白底物对紫外线以及γ-射线辐射后恢复期耐辐射奇球菌R1(Deinococcus radiodurans R1,DRR1)的蛋白酶变化进行了检测.结果发现,DRR1存在高活性大分子量组成性表达蛋白酶,与Karlin等[16]提出的DRR1蛋白酶为预测高表达蛋白(PHX)的设想一致.DRR1包含大量分子量大于140kD 的明胶降解酶和分子量大于120kD的酪蛋白降解酶,其中活性最高的174kD明胶酶在经SDS变性处理后仍有较高活性,该蛋白酶在DRR1受紫外线辐射和电离辐射后恢复期的表达模式存在差异,在γ-射线电离辐射过程中以及电离辐射后恢复的晚期活性较高.此外,还发现一些蛋白酶特异性由辐射所诱导,表明这些蛋白酶可能参与细胞信号通路中蛋白的顺序降解,也提示DRR1损伤修复过程中细胞内存在一个精确的蛋白酶系统.这些蛋白酶的表达与细胞的营养状态相关.同时对一株由本实验室从北京地区土壤中分离到的杆状耐辐射菌RR533.2的明胶和酪蛋白蛋白酶谱进行了测定,结果发现其蛋白酶谱与DRR1相类似.