Ssh10b2与其同源蛋白Ssh10b在细胞含量及固定DNA超螺旋的能力上存在明显差异

摘要

极端嗜热古菌--芝田硫化叶菌(Sulfolobus shibatae)基因组含一对亲缘关系较远的同源基因,ssh10b和ssh10b2.这对同源基因编码的蛋白(Ssh10b和Ssh10b2)属于古菌Sac10b DNA结合蛋白家族.关于Ssh10b以及与其极为相似的硫矿硫化叶菌(S.solfataricus)Sso10b、嗜酸热硫化叶菌(S.acidocaldarius)Sac10b蛋白已有较多研究,推测这些蛋白可能在染色体组织和包装、DNA重组、基因表达调控等方面起作用.克隆并在大肠杆菌中表达了ssh10b2基因,纯化了重组Ssh10b2蛋白.免疫印迹定量分析表明,ssh10b2在芝田硫化叶菌中有表达,但其细胞含量仅相当于Ssh10b的约十分之一.重组Ssh10b2对双链DNA的亲和力低于Ssh10b.此外,Ssh10b2和Ssh10b在与双链DNA结合时表现出相似的凝胶阻滞模式.有意思的是,Ssh10b2固定DNA负超螺旋的能力明显低于Ssh10b.这些结果提示,Ssh10b和Ssh10b2可能具有不同的生理作用.