硫化氢介导TGF-β1信号通路在早产儿视网膜病变血管损伤中的作用

摘要

目的 探讨硫化氢(H2S)在早产儿视网膜病变(ROP)血管损伤中的作用及其机制.方法 建立大鼠高氧/低氧诱导ROP模型,HE染色观察ROP模型视网膜血管组织变化,ELISA法检测ROP模型血管组织胱硫醚γ裂解酶活性变化,免疫组化法及Western blot法检测ROP模型视网膜血管组织TGF-β1表达情况.建立高氧/低氧刺激人脐静脉内皮细胞模型,MTT法检测人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖情况,Transwell实验检测HUVEC迁移能力,Western blot法检测HUVEC中TGF-β1表达情况.结果 体内模型中ROP组HE染色切片中突破视网膜内界膜的血管内皮细胞较对照组多.ROP组视网膜血管组织H2S生成高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).免疫组化检测显示ROP组视网膜血管组织TGF-β1表达较对照组少.Western blot法检测示ROP组视网膜血管组织中TGF-β1、pSmad 2/3表达水平较对照组低,差异具有统计学意义(均P<0.05).ROP组HUVEC生存率低于对照组HUVEC.对照组中采用NaHS处理的HUVEC细胞生存率高于未经处理的细胞,ROP组中采用NaHS处理的HUVEC细胞生存率高于未经处理的细胞,差异具有统计学意义(均P<0.05).ROP组HUVEC迁移能力低于对照组.对照组中经NaHS处理后的迁移细胞数高于未经处理的细胞数,ROP组中经NaHS处理后的迁移细胞数高于未经处理的细胞,差异具有统计学意义(均P<0.05).ROP组HUVEC中TGF-β1、pSmad 2/3表达水平低于对照组.对照组中经NaHS处理后的TGF-β1、pSmad 2/3表达水平低于未经处理的细胞,ROP组中经NaHS处理后的TGF-β1、pSmad 2/3表达水平低于未经处理的细胞,差异具有统计学意义(均P<0.05).结论 大鼠ROP模型中血管组织H2S生成量较高,TGF-β1及其下游信号Smad 2/3表达水平降低.体外细胞实验提示外源性H2S对正常及高氧/低氧造成的HUVEC损伤具有一定的保护作用,能够增强正常及高氧/低氧HUVEC的迁移能力,下调正常及高氧/低氧HUVEC中TGF-β1及其下游信号Smad 2/3表达水平,H2S可能通过介导TGF-β1信号通路参与视网膜血管病变早期的血管发育.