单细胞凝胶电泳在真核微生物上的应用

摘要

目的利用真核微生物作为单细胞凝胶电泳的生物材料,以建立一种筛选鉴别环境遗传毒物的新方法.方法酿酒酵母和原生动物四膜虫经培养后,对比常规动物细胞实验方法进行单细胞凝胶电泳,并对实验条件进行改进.结果与动物原代和传代细胞相比,四膜虫培养时间短,成本低廉,可实现无损前处理,四膜虫DNA解旋后电泳所需电压和电流都必须较低,即15V,180mA.对H2O2、K2Cr2O7和丝裂霉素(MMC) 3种DNA损伤剂的初步测试表明,它们可以引起四膜虫DNA不同程度的损伤,最低效应浓度分别为100、10、1μmol/L.酵母菌因DNA含量少,未见明显的彗星现象. 结论四膜虫单细胞凝胶电泳从方法上完全可以与动物原代细胞和传代细胞互相替代, 但四膜虫单细胞凝胶电泳试验快速、经济、简便的优势,则是后二者所不及的.