组织特异性启动子SM22α逆转录病毒载体的构建和效率

摘要

目的 克隆小鼠SM22α基因的启动子,检测启动子特异性及效率. 方法构建重组慢病毒载体,提纯病毒并感染细胞. 结果序列分析表明,PCR扩增片段包含有完整的启动子元件和重要的功能框,成功克隆SM22α启动子.获得含特异SM22α启动子的重组慢病毒,滴度为1×108TU/mL.重组病毒分别感染血管平滑肌细胞(VSMCs)与非血管平滑肌细胞(NSMCs).与NSMCs相比,在VSMCs中荧光强度明显增高(P＜0.05);与巨细胞病毒(CMV)启动子相比,含SM22α启动子的病毒感染效率无明显差异(P＞0.05),但诱导绿色荧光蛋白表达强度约为CMV启动子的80%. 结论 SM22α启动子具有高度的平滑肌细胞特异性;诱导蛋白表达的能力较强.