反义TIMP-1对实验性肝纤维化中TIMP-1及MMP-13表达的影响

摘要

目的:探讨反义TIMP-1对实验性肝纤维化中TIMP-1及MMP-13表达的影响.方法:抽提TIMP-1/PCDNA3.1(+)重组质粒、PCDNA3.1(+)表达质粒,以脂质体Lipofectmine2000包埋;以复合因素复制肝纤维化大鼠模型,分为正常对照组(12只 N)、肝纤维化组(19只 C)、空质粒对照组(19只 P)、反义TIMP-1组(11只 AT),P组、AT组定期给予腹腔注射脂质体包埋好的PCDNA3.1(+)、TIMP-1/PCDNA3.1(+)质粒50μg,实验周期满时,取剩余N组(12只)、AT组(11只)、C(11只)、P(10只)肝组织;应用HE染色、VG染色观察肝组织病理形态学变化,进行肝纤维化分级,应用SABC法行切片染色,并采用图像分析系统对阳性部位行灰度值测定;采用SPSS软件做方差分析(多个样本均数的两两比较),P＜0.05表示差异有显著性,病理学形态分级采用Ridit检验.结果:反义TIMP-1质粒组与肝纤维化组、空质粒组相比TIMP-1、MMP-13表达明显减少(P＜0.05),空质粒组与肝纤维化组无显著性差异(P＞0.05);正常对照组与各实验组之间的病理学分级有显著性差异(P＜0.05);反义TIMP-1质粒组病理学分级较空质粒组及有明显改善(P＜0.05);空质粒组与肝纤维化组无显著性差异(P＞0.05).结论:反义TIMP-1/PCDNA3.1(+)真核细胞表达质粒使TIMP-1、MMP-13的表达受到抑制.