不同浓度A2E对离体猪视网膜色素上皮细胞的影响

摘要

目的 评价体外合成的A2E对猪视网膜色素上皮(RPE)细胞的细胞活力和生物学特性影响,为进一步研究A2E在RPE细胞相关疾病中的作用提供细胞模型.方法 利用全反式视黄醛和乙醇胺体外合成脂褐质荧光基团A2E.不同浓度的A2E(0,50,75,100 μmol/L)作用第3代体外培养的猪RPE细胞30,45,60,90 min,换10% FBS DMEM-F12培养液孵育24 h后 ,倒置荧光显微镜观察荧光强度,IPP 6.0软件灰度扫描定量荧光强度.采用MTT法检测A2E 作用细胞各个时间段的吸光度值,应用SPSS 11.0 软件包对数据进行统计学分析,评价A2E 的细胞毒性及RPE细胞活性.结果 A2E被RPE细胞摄取后主要分布于细胞核周围,具有自发荧光.MTT实验及荧光灰度扫描结果显示,不同浓度的A2E被细胞摄取后细胞活力和荧光灰度扫描结果不同,以50 μmol/L浓度A2E作用RPE细胞60 min时,细胞内荧光强度高同时细胞活力强.结论 体外培养的猪RPE细胞摄取体外合成的50 μmol/L A2E 60 min后细胞对A2E的摄取较多,A2E对细胞的毒性相对较低,该条件下进行A2E对离体猪RPE细胞的研究较好.