赤点石斑鱼卵型芳香化酶基因启动子调控绿色荧光蛋白在斑马鱼早期生殖腺中的表达

摘要

P450芳香化酶(P450arom)是生物体内合成雌激素的关键酶.为研究赤点石斑鱼(Epinephelus akaara)卵型芳香化酶基因(EaCyp 19ala)启动子的调控作用,构建了EaCyp19ala启动子9个不同的5'缺失片段与绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)组成的表达载体,分别命名为pEaCyp19ala-EGFP1-9.在COS-7细胞中的瞬时转染实验证明载体pEaCyp19a1a-EGFP7具有很强的转录活性.通过显微注射,将线性化的pEaCyp19ala-EGFP7载体注入斑马鱼单细胞期受精卵中,定期在荧光显微镜下观察GFP的表达.结果发现GFP在胚胎期(受精后约48h)开始表达,主要发生在斑马鱼早期生殖腺细胞中,具有明显的性腺特异性.这说明EaCyp19a1a的启动子序列中含有调控其性腺特异表达的顺势作用原件.研究为进一步探明芳香化酶在鱼类性别分化和性别转变过程中的作用奠定了基础.