B型烟粉虱和温室白粉虱热激蛋白90基因(hsp90)的全长cDNA克隆与系统发育分析

摘要

B型烟粉虱Bemisia tabaci (Gennadius) biotype B和温室白粉虱Trialeurodes vaporariorum均为全球普遍发生的重要害虫.本研究以其他昆虫热激蛋白90基因(hsp90)保守区域设计兼并引物扩增两种粉虱hsp90中间片段,然后利用RACE技术获得全长cDNA.温室白粉虱hsp90全长cDNA的开放性阅读框2 166 bp,编码722个氨基酸;烟粉虱hsp90全长cDNA的开放性阅读框2 160 bp,编码720个氨基酸.两种粉虱HSP90的完整氨基酸序列相似性高达92.94%,并均具有定义HSP90家族签名序列的5个氨基酸保守区域和末尾基序"MEEVD".通过real-time PCR技术,探测到两个基因在mRNA水平上皆能高温诱导表达.采用昆虫纲所有完整HSP90氨基酸序列进行Kimura双参数遗传距离分析并构建NJ进化树,结果显示hsp90在昆虫纲低级阶元水平和高级阶元水平系统进化上能得到一个较理想结果.本研究结果为B型烟粉虱和温室白粉虱抗逆适应性研究提供基础,并进一步验证保守的功能基因hsp90可以作为研究生物系统发育的手段之一.