蛹虫草菌丝体中SOD提纯工艺及鉴定

摘要

深层发酵蛹虫草菌丝体中饱和硫酸铵分级沉淀法提取超氧化物歧化酶(SOD),单因素实验基础上,运用响应面法优化提取工艺,获得最佳SOD提取工艺参数,在此条件下将粗酶液上Sephadex G-100柱和DEAE-Sepharose FF柱纯化,并采用紫外光谱扫描、SDS-PAGE法、原子吸收分光光度法对SOD分子结构上所携带的金属辅基进行了鉴定.结果表明:SOD的最佳提取工艺条件:液料比22∶1、pH8.2、提取时间1.7h,总酶活力为142.1U/mL,纯化倍数为3.78;全波长扫描在258nm和265 nm有吸收峰,SOD相对分子质量在2 5000～3 5000之间,Cu、Zn的含量分别为2.06％、3.88％.因此,深层发酵蛹虫草菌丝体中SOD类型为Cu/Zn-SOD.