一种基于纳米金介导生物沉积铂催化氢还原的电化学免疫分析新方法

摘要

发展了一种基于纳米金介导生物沉积铂并以铂催化氢还原伏安法进行检测的高灵敏电化学免疫分析新方法.该方法采用夹心免疫分析模式.实现了人免疫球蛋白(h IgG)的测定.首先在聚苯乙烯微孔板中固定羊抗人h IgG捕获抗体,h IgG捕获后,碱性磷酸酶标记的h IgG抗体修饰的纳米金探针通过与h IgG形成夹心复合物而结合在微孔板上.结合的碱性磷酸酶催化抗坏血酸磷酸酯底物水解产生抗坏血酸,后者在纳米金的介导下还原铂离子沉积于纳米金表面.沉积的金属铂用王水[V(HNO3):V(HCI)=1:3]溶解并电富集于玻碳电极上.通过测定铂催化氢还原产生的阴极电流,可实现h IgG的高灵敏分析.催化氢还原电流与h IgG浓度对数在100 ng/mL～2μg/mL及100 pg/mL～100 ng/mL之间呈线性相关性,检测限达22 pg/mL.由于铂催化氢还原的高灵敏度及纳米金介导的生物沉积放大反应,该法具有较高的分析灵敏度,且免疫分析微孔板模式使得该法可同时用于大量样品的分析.