MALDI-TOF质谱技术研究铁蛋白蛋白壳表层的电荷分布

摘要

采用SephacrylS-300排阻层析和DEAE-纤维素层析技术分离纯化鱼工鱼肝铁蛋白(Liver ferritin of Dasyatis Akajei,DALF).纯化后的DALF经梯度聚丙烯酰胺凝胶再次分离后,显示出两条凝胶带,即单分子DALF和双聚态DALF.选用基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱技术(MALDI-TOFMS)研究DALF的电荷分布时,发现DALF蛋白壳表层上显示出三种不同质荷比的分子离子峰,其质荷比为10369.41m/z、20710.33m/z和41809.43m/z.当DALF亚基被解离后,这三个分子离子峰随之消失,因而推测DALF蛋白壳表层存在着高密度正电荷区域,并与该蛋白形成非电惰性有着密切联系.通过拟出DALF蛋白壳表面电荷分布模型,进一步阐明DALF从铂电极上接受电子的机理.