一株J亚型禽白血病病毒的分离鉴定及其gp85基因的序列分析

摘要

为确定安徽巢湖某地方品种养鸡场的疑似禽白血病(avian leukosis,AL)的病原,以DF-1细胞从肿瘤组织中分离病毒,采用RT-PCR方法进行鉴定,并对其感染细胞上清进行透射电镜观察.同时对送检病鸡的心、肝、脾及腺胃等进行组织病理学观察,最后将扩增出的gp85基因与GenBank收录的其他ALV序列进行比对分析.结果表明:PCR扩增产物大小约为928 bp,经测序证实为ALV gp85基因,将该分离株命名为AHCH-2018株.透射电镜观察到具有囊膜的大小约100 nm的病毒粒子.组织病理学结果显示,病鸡的心、肝、脾及腺胃中有大量成灶淋巴细胞增殖.遗传进化分析结果表明,分离株的gp85基因与多株ALV J参考毒株核苷酸序列的同源性为94.1％ ～99.5％,且与GD1401J株的核苷酸同源性最高,达99.5％,与A、B、C、D、E亚群同源性为46.5％ ～49.7％.该分离株与J亚群原型毒株处于同一大分支.本研究为了解安徽土鸡种群中禽白血病的分子流行病学特点提供了一定的数据参考.