流产布鲁氏菌2308株磷酸甘露糖变位酶pmm基因缺失株构建及鉴定

摘要

旨在构建流产布鲁氏菌2308株pmm基因缺失株.PCR扩增流产布鲁氏菌2308株pmm基因的上、下游同源臂片段,并与枯草芽孢杆菌上SacB基因片段融合.连接至自杀载体PGEM-7Zf+,构建自杀载体PGEM-7Zf+ △pmm-SacB.电转化至流产布鲁氏菌2308株感受态细胞内,通过氨苄抗性和蔗糖敏感性筛选,获得基因缺失株2308△pmm,对其进行PCR鉴定和稳定性检测.成功构建可稳定遗传的2308△pmm基因缺失株,并在15代内未发生回复.在此基础上可以对2308△pmm进行深入研究.