SPK1基因转染脂肪间充质干细胞对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠的治疗效果及对辅助性T细胞17/调节性T细胞平衡的影响

摘要

目的 考察SPK1基因转染脂肪间充质干细胞(ADMSC)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠的治疗效果及对辅助性T细胞17/调节性T细胞(Th17/Treg)平衡的影响.方法 采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55对小鼠进行EAE诱导,将44只小鼠随机分为4组:空白对照组(NC组)、模型组(EAE组)、ADMSC组和ADMSC-鞘氨醇激酶1(SPK1)组.在免疫后40 d时,对小鼠进行脑与脊髓的病理学观察、脑组织Th17/Treg相关炎症指标检测、脑和脊髓组织中白细胞介素17和叉头框蛋白P3蛋白表达检测以及脾脏免疫细胞的流式细胞术分析.结果 免疫后40 d时,EAE组小鼠脑和脊髓组织发生严重炎性细胞浸润髓鞘脱失严重,ADMSC组与ADMSC-SPK1组脱髓鞘和轴突损伤得到改善;与EAE组比较,ADMSC 组和ADMSC-SPK1 组的脑组织IL-17A(Z = 1.021,P =0.017;Z = 1.193,P=0.009)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)(Z = 2.540,P = 0.004;Z = 3.005,P= 0.006),与ADMSC 组比较,ADMSC-SPK1 组的脑组织IL-17A 与TNF-α水平显著降低(Z = 1.223,P = 0.011;Z=2.364,P =0.010);小鼠脑和脊髓组织中IL-17A在ADMSC组的表达水平显著降低(t = 10.323,P =0.013;t=7.422,P = 0.008),且ADMSC-SPK1 组显著低于ADMSC 组(t=14.244,P=0.017;t=16.865,P=0.006);Foxp3在ADMSC 组的表达水平显著升高(t = 14.544,P = 0.008;t=9.420,P=0.002),且ADMSC-SPK1 组显著高于ADMSC 组(t=9.654,P =0.005;t = 11.535,P =0.009);ADMSC-SPK1 组小鼠脾脏中的IL-17 + IFN-γ+T细胞比例降低,CD25+Foxp3+Treg细胞比例升高.结论 SPK1转染ADMSC对EAE小鼠具有理想的治疗效果,且该效果优于未经SPK1转染的ADMSC,其机制可能与ADMSC-SPK1能显著降低EAE小鼠Th17/Treg细胞比率并减少相关炎症细胞因子的释放有关.