糖皮质激素环境下骨重塑相关细胞外泌体miRNA变化

摘要

目的探讨糖皮质激素刺激下骨重塑相关细胞外泌体miRNA的变化。方法体外培养小鼠成骨细胞、破骨细胞,提取上清液中外泌体进行透射电镜观察、粒径分析、CD9／CD81表面标记物检测;利用不同浓度（1μg/ml,10μg/ml,100μg/ml）地塞米松刺激48 h,观察两种细胞增殖情况;收集外泌体检测骨重塑相关miR-133、miR-214、miR-4697和miR-487的表达。结果不同浓度地塞米松均能够抑制两种细胞增殖,其中100μg/ml组与对照组相比抑制作用显著（P〈0.05）。当地塞米松浓度为100μg/ml时,成骨细胞外泌体miR-133含量降低为对照组的45%,miR-214降为对照组的12%,miR-4697降为对照组的56%（P均〈0.05）。当地塞米松浓度为1μg/ml时,破骨细胞外泌体内miR-133和miR-487上升为对照组的12倍,miR-214升高为对照组1.67倍,miR-487升高2.12倍（P均〈0.05）。结论随着糖皮质激素浓度增加,成骨细胞外泌体内miR-133、miR-214、miR-4697含量依次递减,而miR-487含量随着糖皮质激素浓度先升高后降低。小剂量糖皮质激素刺激破骨细胞后,其外泌体内4种miRNA含量均增加,而高浓度糖皮质激素刺激后miRNA含量降低。