Analyse de l'influence de la chromatine et de l'heterochromatine dans la reparation des dommages crees par les rayons UV dans l'ADN chez la levure Saccharomyces cerevisiae.

摘要

Les rayons UV du soleil causent une variete de dommages dans l'ADN, parmi lesquels les dimeres cyclobutilyques de pyrimidines (CPD) sont consideres comme hautement toxiques et dommageables pour un organisme. Par consequent, il est important de comprendre comment la machinerie de reparation par excision des nucleotides (la NER), assure la reparation in vivo des CPD present dans l'ADN empaquete sous forme de chromatine. Il est connu que la presence du nucleosome inhiberait la NER, mais les details fonctionnels demeurent mal compris, de meme que les mecanismes cellulaires necessaires pour contourner cette inhibition offerte par la chromatine. Chez la levure Saccharomyces cerevisiae, les genes SIR (SIR1, SIR2, SIR3 et SIR4) permettent la formation d'une structure heterochromatique sur le locus du type sexuel et les telomeres. Cependant, l'impact de cette heterochromatine sur la reparation des CPD est tres peu etudie. Les travaux presentes dans cette these de doctorat ont permis de caracteriser l'impact des genes SIR dans la survie des cellules apres irradiation aux rayons UV, de meme que dans la reparation de l'ADN des regions heterochromatiques. Premierement, a l'aide d'une methode basee sur le suivi de la croissance en milieu de culture liquide, nous avons demontre que les mutants sirDelta sont plus resistants aux rayons UV par rapport aux cellules de types sauvages. Ce phenotype serait relie a l'effet de pseudo-diploidie present dans ces mutants, et plus precisement a la recombinaison homologue en phase G2/M du cycle cellulaire. Les proteines Sir ne joueraient donc pas un role directement dans la reparation des CPD. Par la suite, nous avons procede a l'analyse de la cinetique de reparation de l'ADN du locus du type sexuel et des telomeres dans des cellules de type sauvage et des mutants si2rDelta, sir3Delta, et rad26Delta. A partir des resultats obtenus, nous avons pu tirer differentes conclusions preliminaires laissant croire que la presence de l'heterochromatine faite par les proteines Sir n'inhiberait pas davantage la reparation par rapport a la presence des nucleosomes, du moins dans les regions sous-telomeriques. De plus, nos resultats demontreraient que la reparation couplee a la transcription pourrait jouer un role important dans la reparation de ces regions. Ces hypotheses devront evidemment etre testees.Mots cles : Reparation de l'ADN, Saccharomyces cerevisiae, dimeres cyclobutylique de pyrimidine (CPD), rayons UV, telomeres, reparation par excision de nucleotide, recombinaison homologue.