Caracterisation de la signalisation et des roles fonctionnels des Hedgehogs dans la morphogenese gastrointestinale.

摘要

Les Hedgehogs (Hh) sont des morphogenes multifonctionnels qui ont des roles importants dans l'embryogenese et la morphogenese de plusieurs organes. Leur role dans le developpement de la glande gastrique humaine n'est pas connu. Peu est connu de la signalisation Hh, plus precisement de Sonic Hedgehog (Shh), dans la glande gastrique humaine adulte, autant dans sa localisation et son association aux differents types cellulaires gastriques que dans son role fonctionnel dans cet organe. Les modeles murins de deletion classique des molecules de la signalisation Hh subissent, dans la grande majorite, une mort neonatale ou au stade somites rendant ces modeles inutiles pour l'etude du maintien de l'homeostasie du tube digestif adulte, autant au niveau de l'intestin que de l'estomac. Dans un premier temps, les patrons d'expression des differents genes cles impliques dans la voie de signalisation Hh dans le developpement foetal humain de la glande gastrique ont ete determines a l'aide de tissus gastriques foetaux ages entre 14 et 20 semaines de gestation. Dans un deuxieme temps, les roles fonctionnels et physiologiques de Shh, dans l'homeostasie de l'intestin adulte et dans la morphogenese et homeostasie de l'estomac ont ete elucides par la generation de souris possedant une deletion conditionnelle de Shh a l'epithelium de l'intestin ou de l'estomac a l'aide du systeme Cre/loxP.;L'etude du modele murin Villine-Cre; ShhloxP/loxP, qui possede une deletion de Shh a l'epithelium intestinal, a permis d'elucider les roles fonctionnels de Shh dans l'homeostasie de l'intestin. Nous avons constate que Shh a un role specifique dans l'homeostasie intestinale puisque les souris experimentales presentent un allongement villositaire. Shh est egalement implique dans la maturation des cellules caliciformes et dans l'inhibition de la proliferation epitheliale intestinale. Les resultats montrent aussi que Ihh semble, quant a lui, avoir un role compensateur puisqu'il se relocalise dans les regions qui expriment normalement Shh.;L'etude du modele murin Foxa3-Cre; ShhloxP/loxP, qui possede une deletion de Shh dans l'epithelium gastrique, a permis d'elucider les roles de Shh dans le developpement et le maintien de la glande gastrique. Nous avons determine que Shh a un role dans la morphogenese de la glande gastrique et dans le maintien de ce dernier. En effet, l'architecture foveolae-glande est fortement affectee par la perte epitheliale de Shh. Les resultats demontrent egalement que Shh a un role determinant dans la differenciation des cellules parietales puisque ces dernieres sont absentes chez les souris experimentales.;Mots cles: Shh et Ihh, Cellules epitheliales intestinales et gastriques, Facteur de transcription Gli, Bmp, Morphogenese.;L'analyse des patrons d'expression des ligands SHH et Indian Hedgehog (IHH), des recepteurs PATCHED et SMOOTENED, des effecteurs GLI et de genes cibles de la voie de signalisation Hh dans la glande gastrique humaine en developpement, a confirme la presence de la majorite de ces proteines des 14 semaines de gestation. Ces effecteurs n'ont ete detectes qu'au niveau des cellules a mucus de surface, des cellules du foveolae et des cellules zymogeniques mais pas au niveau des cellules parietales. L'expression strictement epitheliale de presque toutes ces proteines suggere fortement l'activation exclusivement autocrine de cette voie de signalisation dans la glande gastrique humaine foetale. Ces patrons d'expression different de ceux retrouves dans la glande gastrique murine foetale ou adulte.