Effet de differents ratios d'omega-6/omega-3 et de l'enterolactone sur l'expression de genes impliques dans l'implantation embryonnaire et sur la secretion de prostaglandines dans les cellules endometriales chez la vache laitiere.

摘要

Presentement, l'industrie laitiere est aux prises avec des problemes de reproduction chez les vaches, dont la mortalite embryonnaire est l'un des plus importants. Le plus souvent, la perte de l'embryon survient durant la periode de peri-implantation, car celui-ci ne parvient pas a inhiber suffisamment la secretion de prostaglandine F2alpha (PGF2alpha) par les cellules epitheliales de l'uterus. Plusieurs etudes ont demontre que la survie embryonnaire chez la vache laitiere peut etre amelioree par un supplement alimentaire en graines de lin, lesquelles sont riches en acide alpha-linolenique (ALA), un omega-3, et en lignanes. De plus, notre equipe de recherche a observe que le niveau de secretion des prostaglandines, ainsi que le niveau d'expression de plusieurs genes uterins impliques dans la survie embryonnaire (jour 17), sont modules par un supplement alimentaire de graines de lin durant la periode de peri-implantation embryonnaire. Il a ete demontre que la graine de lin peut diminuer le ratio sanguin d'acides gras omega-6/omega-3 et qu'elle augmente la concentration circulante d'enterolactone (ENL), un metabolite de lignane qui agit comme phyto-oestrogene et comme antioxydant. Cependant, ces etudes in vivo ne permettent pas de distinguer si les effets de la graine de lin sur l'uterus sont dus aux acides gras, a l'ENL ou aux deux, ni de distinguer comment les differents types cellulaires de l'endometre repondent a ces traitements.;L'objectif de ce projet de recherche etait de determiner quels sont les effets directs de differents ratios omega-6/omega-3 et de l'ENL sur l'expression de differents genes selectionnes et sur la secretion de prostaglandines dans un modele in vitro de culture cellulaire endometriales primaires. Tout d'abord, 16 genes ont ete selectionnes parmi ceux etant differentiellement exprimes dans l'uterus de vaches au jour 17 de la gestation, lesquelles avaient recu ou non un supplement alimentaire de 10% graines de lin. Ces 16 genes sont impliques ou sont suspectes de jouer un role dans la survie embryonnaire et/ou la synthese des prostaglandines. Tout d'abord, afin de mieux connaitre le profil d'expression de ces genes dans l'endometre, la variation du niveau d'expression de ces genes au cours du cycle oestral a ete caracterisee in vivo par PCR quantitatif en temps reel (RT-qPCR). Par la suite, deux types cellulaires ont ete isoles a partir d'uterus de vache; les cellules stromales et les cellules epitheliales. Ces cellules ont ete traitees avec de la progesterone et de l'interferon-tau, de maniere a mimer la presence d'un embryon en debut de gestation. Ces cellules uterines ont ete traitees avec 6 differents ratios d'acides gras omega-6/omega-3 (acide linoleique / acide alpha-linolenic), avec de l'ENL ou avec ces deux traitements (acides gras + ENL). Suite a ces traitements, les niveaux d'ARN messagers des 16 genes selectionnes ont ete mesures par RT-qPCR. La concentration de PGF 2alpha, de prostaglandine E 2 (PGE2) et le ratio PGE 2/PGF2alpha ont ete mesures par " enzyme immun assay (EIA) ".;Les resultats obtenus demontrent que la variation du ratio omega-6/omega-3 et/ou que l'ENL peuvent moduler l'abondance relative d'ARN messager de plusieurs genes, mais de maniere differente dependamment du type cellulaire etudie. De plus, une diminution du ratio omega-6/omega-3 entraine une diminution de la production de prostaglandines et une augmentation du ratio PGE2/PGF2alpha par les cellules epitheliales. La presence d'ENL dans le milieu de culture a permis de diminuer la secretion des prostaglandines etudiees de maniere dose-dependante dans les cellules stromales et epitheliales. De plus, nos resultats demontrent une interaction entre l'ENL et la presence d'acides gras au niveau de la reduction des secretions de prostaglandines. Pour les cellules stromales, nous observons une association entre la diminution de secretion des prostaglandines par l'ENL et la diminution de l'abondance d'ARN messagers de la prostaglandin E synthase (PTGES) et de l'Aldo-keto reductase family 1, member B1 (AKR1B1), deux genes impliques dans la synthese des prostaglandines. Les resultats obtenus dans le cadre de cette etude demontrent que la variation des ratios d'omega-6/omega-3, ainsi que l'ENL agissent directement sur l'expression de certains genes et sur la secretion des prostaglandines dans les cellules stromales et epitheliales de l'endometre bovin. Cependant, les reponses cellulaires obtenues different en fonction du type cellulaire etudie.;Mots cles : prostaglandines, enterolactone, acides gras, endometre, vache laitiere.