Etude de la regulation du gene pLC30-15, induit par la secheresse chez Lycopersicon chilense (French text).

摘要

Les stress environnementaux, en particulier la secheresse, limitent la repartition et la productivite des plantes. Cependant certaines especes vegetales sont capables de s'adapter au stress hydrique par modification de leur morphologie et de leur metabolisme. Ce processus est associe a l'induction de plusieurs genes qui encodent des proteines impliquees dans cette adaptation physiologique. Chez Lycopersicon chilense, une tomate endemique des regions desertiques du Chili et du Perou, l'expression d'un gene designe pLC30-15 augmente durant le stress hydrique, et est positivement correlee avec le degre de tolerance a la secheresse. La proteine encodee par ce gene fait partie de la famille des dehydrines, qui se caracterise par une hydrophilicite tres elevee et une stabilite a l'ebullition. Le role exact de ces proteines reste a determiner mais leurs proprietes indiquent qu'elles pourraient etre associes a la protection des structures cellulaires contre la deshydratation. Dans le but de comprendre les mecanismes moleculaires qui regulent l'expression du gene pLC3015 au niveau transcriptionnel, la region promotrice a ete isolee a partir d'une banque genomique de L. chilense. Le criblage de la banque a ete effectue avec la sonde d'ADNc de pLC30-15. L'analyse de sequence a revele la presence d'elements de regulation homologues a des sequences identifiees dans les regions promotrices de genes inductibles par les stress environnementaux. Des deletions en 5' du promoteur pLC30-15 ont ete generees par PCR et introduites dans des feuilles de tabac par la technique de co-culture avec Agrobacterium tumefaciens. L'analyse de l'activite du promoteur entier et tronque en 5' a ete effectuee dans des plants de tabac transgeniques a l'aide du gene rapporteur Gus. Les resultats ont montre que le promoteur pLC30-15 etait inductible par la secheresse et la salinite. Il renferme deux regions importantes pour l'inductibilite en cas de stress hydrique: -805 a -508 et -356 a -156. Une seule region situee entre les positions -657 et -508 est responsable de la reponse de pLC30-15 au stress salin. Aucune activite n'a ete observee chez le tabac transgenique traite avec l'acide abscissique (ABA). Dans le but de determiner la distribution cellulaire du gene pLC30-15 en cas de stress hydrique ou salin, des tests histochimiques de l'activite GUS dans les feuilles, tigelles et racines de tabac transgeniques ont ete realises. (Abstract shortened by UMI.)