合成鱼腥草素同系物表面活性与抗菌和免疫调节活性关系的研究

摘要

本文以合成鱼腥草素的分子结构为模型化合物,首次系统合成了丁酰乙醛亚硫酸钠(HOU-C<,4>)、己酰乙醛亚硫酸钠(HOU-C<,6>)、辛酰乙醛亚硫酸钠(HOU-C<,8>)、癸酰乙醛亚硫酸钠(合成鱼腥草素,HOU-C<,10>)和十二酰乙醛亚硫酸钠(HOU-C<,12>)等5个合成鱼腥草素的同系物.本文用表面张力法系统地研究了合成鱼腥草素同系物的表面活性及其变化规律;以金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、大肠杆菌等为靶标菌(微生物模型),研究了合成鱼腥草素同系物的抗菌活性及其变化规律;以碳廓清指数、免疫器官重量和血清溶菌酶为主要指标,研究了合成鱼腥草素同系物对小鼠的免疫调节作用及变化规律.以脂肪酸为起始物,在一定条件下反应制得中间产物,中间产物经过进一步反应得粗产品,然后将粗产品用乙醇溶液反复结晶,得到纯度大于97﹪的白色针状结晶产品.表面活性研究结果表明,长链合成鱼腥草素同系物具有表面活性剂的特征.以金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、大肠杆菌和啤酒酵母为微生物模型,通过纸片法进行体外抑菌活性试验发现,合成鱼腥草素同系物对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、大肠杆菌和啤酒酵母都有不同程度的抑菌活性,其中对枯草杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌活性最强,以金黄色葡萄球菌和枯草杆菌为模型,用比浊法研究合成鱼腥草素同系物的抑菌活性.为了探讨合成鱼腥草素同系物的杀菌机理,用合成鱼腥草素同系物对大肠杆菌、枯草杆菌和金黄色葡萄球菌处理40min,发现三种菌液的电导值变化很小,最高才20﹪左右.说明鱼腥草素同系物对细菌细胞膜的透性无显著影响.其抑菌和杀菌主要不是破坏细菌的细胞膜.体外试验还发现,HOU-C<,8>、HOU-C<,10>和HOU-C<,12>在低浓度下增加溶菌酶的活性,高浓度抑制酶的活性.表明小白鼠血清中溶菌酶活性的增强,可能是合成鱼腥草素与溶菌酶直接作用所致.在0.4mg/ml浓度时,HOU-C<,6>、HOU-C<,8>、HOU-C<,10>和HOU-C<,12>能显著增加小鼠脾脏NK细胞活性.合成鱼腥草素同系物在本研究条件下对小鼠脾脏和胸腺指数无显著影响.上述研究结果说明:延长合成鱼腥草素同系物的碳链可以得到疏水能力更强的化合物;疏水能力强的化合物也极有可能是抑菌活性和免疫调节作用更强的化合物;延长鱼腥草素同系物的碳链或许可以寻找到抗菌活性以及免疫调节活性更高的化合物.本文首创了用表面活性的方法研究合成鱼腥草素烷基链长度的变化,对其疏水能力、抑菌能力和免疫能力的影响;首次发现了合成鱼腥草素的疏水能力与其抑菌和免疫增强作用成正比的规律.开阔了天然活性成分尤其是鱼腥草素的研究视野,拓展了研究领域,具有理论和实际价值.

目录

文摘

英文文摘

第1章 文献综述

1 鱼腥草的研究进展

1.1鱼腥草的化学成分

1.2鱼腥草的药用价值

1.3鱼腥草的食疗保健作用和产品开发

2 合成鱼腥草素的研究进展

2.1鱼腥草素的抗菌作用

2.2鱼腥草素的免疫增强作用

引 言

第2章 鱼腥草素同系物的合成及表面活性研究

1 实验材料

1.1药品试剂

1.2主要设备

1.3分析仪器

1.4合成装置

2 实验方法

2.1合成工艺路线

2.2定性试验

2.3含量测定[126]

2.4表面张力的测定

3 实验结果

3.1红外光谱分析结果

3.2反应温度对产物I收率的影响

3.3定性鉴定结果

3.4熔点测定结果

3.5干燥失重和游离亚硫酸盐测定结果

3.6结晶次数对纯度的影响

3.7表面张力测定结果

4 讨论

4.1脂肪酸脱羧反应对得率的影响

4.2定性鉴定和定量分析方法

4.3合成鱼腥草素的表面活性

5 本章小结

第3章 合成鱼腥草素同系物抗菌特性研究

1 实验材料和方法

1.1实验材料

1.2实验方法

2 结果与讨论

2.1合成鱼腥草素同系物纸片法抑菌结果

2.2最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度测定结果(MBC)

2.3杀菌时间试验结果

2.4对细菌细胞膜透性的影响

2.5抑菌能力与烷酰基碳原子数的关系

2.6抑菌能力与临界胶团浓度(CMC)的关系

3 小结

第4章 合成鱼腥草素同系物对免疫影响的研究

1 实验材料

1.1鱼腥草素同系物

2.2实验动物

2.3试剂

2.4主要仪器

2 实验方法

2.1巨噬细胞吞噬功能试验(小鼠碳粒廓清试验)

2.2小鼠脾脏自然杀伤细胞(natural killer cell，NK)活性测定

2.3溶菌酶活力的测定

2.4统计方法

3 实验结果

3.1烷基酰乙醛亚硫酸钠对小白鼠廓清指数的影响

3.2 HOU-Cn对小鼠免疫器官的影响

3.3鱼腥草素同系物对正常小鼠脾胀NK细胞活性的影响

3.4鱼腥草素同系物对溶菌酶活力影响结果

3 讨论

3.1 HOU-Cn对吞噬细胞的影响

3.2对免疫器官重量的影响

3.3对NK细胞活性的影响

3.4免疫调节和表面活性的关系

4 本章小结

结 论

展 望

参考文献

缩写词语表

致 谢

攻读学位期间发表论文

附 录