针刺预防性抗老化治疗对快速老化模型小鼠SAMP8影响的实验研究

摘要

目的:观察针刺预防性抗老化治疗对快速老化模型小鼠SAMP8行为学及海马神经元形态的影响,探讨针刺对阿尔茨海默病的预防性干预作用。
　　 方法:选取7月龄快速老化模型小鼠(SAMP8)30只,随机分为模型组、针刺组和束缚组；抗快速老化模型小鼠(SAMR1)10只作为正常对照组。针刺组给予针刺预防性治疗,选取百会及印堂穴并加电针刺激,隔日1次,4周为1个疗程,共3个疗程；束缚组给予与针刺组小鼠同等强度和时间的束缚。分别在针刺干预前及每个疗程后应用Morris水迷宫观测各组小鼠空间参考记忆能力的变化,分析针刺预防性治疗对SAMP8小鼠学习记忆能力的影响；行为学检测结束后,各组小鼠麻醉后行多聚甲醛经腹主动脉灌注,取含有海马的脑组织,制作切片,利用尼氏染色技术在光镜下观察各组小鼠海马神经元的形态学改变,并利用图像分析系统计算各组小鼠海马CA1区锥体细胞层尼氏染色的平均灰度值,分析针刺预防性治疗对SAMP8小鼠海马神经元形态及功能的影响。
　　 结果:
　　 1行为学检测:在预防性针刺3个疗程后,与R1对照组比较,P8模型组小鼠在定位航行试验中表现出明显的学习记忆障碍,逃避潜伏期显著延长(P<0.05),针刺组的逃避潜伏期与P8模型组和束缚组比较显著缩短(P<0.05),与R1对照组比较无显著差异(P>0.05)；空间探索试验中针刺组在原平台象限的停留时间显著多于P8模型组和束缚组(P<0.05),与R1对照组比较无显著差异(P>0.05)。
　　 2病理学检测:R1对照组神经元体积较大,形态规则,细胞排列紧密,结构清晰,核周尼氏体致密；P8模型组神经细胞体积较小,排列紊乱,部分神经元形态不规则,核周尼氏体减少；针刺组大部分神经元形态较完整,细胞排列整齐、致密,部分细胞核周尼氏体含量增多,与R1对照组相比,虽然神经元数量及尼氏体含量有差异,但在形态结构方面较为接近,与P8模型组比较则在各方面都有明显改观。P8模型组小鼠海马CA1区锥体细胞层尼氏染色的平均灰度值显著低于R1对照组(P<0.01),P8针刺组小鼠海马CA1区锥体细胞层尼氏染色的平均灰度值显著高于P8模型组(P<0.05),而与R1对照组比较无显著性差异(P>0.05)。
　　 结论:
　　 1行为学检测结果显示SAMP8小鼠在10月龄出现认知功能受损的表现,开始进入明显的快速老化期；经针刺预防性治疗后的SAMP8小鼠在10月龄未出现明显的认知功能受损表现,提示针刺预防性治疗对SAMP8的快速老化进程存在一定的延缓作用。
　　 2病理学检测结果显示SAMP8小鼠海马神经元内的尼氏体数量减少,神经元合成蛋白的功能下降；经针刺预防性治疗后的SAMP8小鼠海马神经元未见明显损伤,提示针刺预防性治疗可以改善神经元的功能状态和细胞形态,减少或延迟了神经元的丢失。

目录

文摘

英文文摘

中英文缩略词

文献综述

综述一、针灸治疗阿尔茨海默病的研究进展

1 概述

2 临床研究进展

3 实验研究进展

4 问题与展望

参考文献

综述二、快速老化模型小鼠SAMP8在中医药研究领域的应用概况

1 快速老化模型小鼠(SAM)概述

2 其他相关AD动物模型的研究

3 SAMP8在中药抗衰老相关研究中的应用

4 SAMP8在针灸抗衰老相关研究中的应用

5 SAMP8相关的增龄性研究

6 SAMP8的应用前景及意义

参考文献

前言

技术路线

材料与方法

1 动物与分组

2 仪器与试剂

3 处理方法

4 行为学检测

4.1 实验设备

4.2 实验内容

5 病理学检测

5.1 取材及制作切片

5.2 尼氏染色过程

5.3 形态学观察

5.4 图像分析

6 数据处理

实验结果

1 行为学检测

2 病理学检测

2.1 形态学观察

讨论

1 实验动物模型的选择

2 中医对AD的认识及实验用穴的选择

3 针刺预防性治疗对SAMP8学习记忆能力的影响

4 针刺预防性治疗对SAMP8海马神经元形态的影响

5 本实验创新之处

参考文献

致谢

个人简历