作用于绿脓杆菌外排泵的药物筛选模型的建立及初步应用

摘要

绿脓杆菌(pseudomonas aeruginosa),又名铜绿假单胞菌是一种重要的院内感染条件致病菌,且由于它具有先天的和后天获得的耐药性,临床治疗十分困难,一旦感染,死亡率很高.绿脓杆菌对多种不同种类的抗生素高度耐药,其耐药机理十分复杂,近几年来研究发现,绿脓杆菌内的主动排出系统在绿脓杆菌的多重耐药性中起着极其重要的作用.作者以绿脓杆菌的外排泵作为药物筛选的靶点,用过量表达外排泵的绿脓杆菌Y5和外膜微孔蛋白(OprD2) 缺陷菌株7208以及绿脓杆菌敏感菌株PAO1建立了一个作用于绿脓杆菌外排泵的药物筛选模型.应用此模型可以初筛作用于绿脓杆菌外排泵的药物以及与现有已知的抗生素有协同作用的活性物质.应用所建立的方法从2449株微生物发酵液中(真菌1700株,放线菌700 株,海洋细菌49株)筛选得到4株阳性菌,多次发酵表明这4株阳性菌产生抗绿脓杆菌的活性物质的发酵比较稳定,其理化性质有待进一步的研究.

目录

论文：作用于绿脓杆菌外排泵的药物筛选模型的建立及初步应用

摘要

Abstract

1.前言

2.实验材料、仪器、方法

2.1材料

2.2仪器

2.3实验方法

3.结果和讨论

3.1 14种抗菌药物对绿脓杆菌耐药菌株的MIC测定

3.2绿脓杆菌耐药菌株外膜蛋白的分析结果

3.3液闪记数法测定外排泵对抗生素的外排作用

3.4 CCCP抑菌浓度的测定

3.5初筛结果

3.6四株真菌菌丝形态

3.7四株真菌种子、发酵培养基的优化

3.8真菌1408的发酵和初提

4.结语

文献综述 绿脓杆菌的主动外排系编统与耐药性研究进展

1绿脓杆菌的培养及生理生化特征

2绿脓杆菌主动外排系统(efflux systems)的发现

3绿脓杆菌在多重耐药中的耐药机理

3.1绿脓杆菌外排泵的模型

3.2绿脓杆菌四种主动外排系统

3.3不同外排泵外排药物的特异性

3.4外排系统中各亚单位的功能

4绿脓杆菌主动外排系统的进化起源和“原始功能”

5讨论及展望

参考文献

致谢