电感耦合等离子体质谱法测定血清钠——一种候选参考方法的建立

摘要

钠(Na)作为人体中重要的金属离子，有维持细胞内外液容量，维持渗透压和酸碱平衡等功能，是一项重要的临床检验项目。其常规测定方法主要为离子选择电极电位法(ISE)、酶法、干化学法以及火焰原子发射光谱法(FAES)等，这些方法操作简便快速，可满足大批量检测的要求，但由于校准和方法特异性等因素，不同方法结果的变异往往比较大，需要可靠的方法实现标准化。我国目前尚无相应的参考方法，因此建立准确、精密的测定方法是实现血清钠测定标准化的迫切需要。 同位素稀释电感耦合等离子体质谱(ID/ICP-MS)是国际公认的可用于一级参考测量程序的测量原理。与传统参考方法重量法相比，ID/ICP-MS法操作简单快速，对工作人员技术要求低，且比FAES法、IC法更加准确、精密。因此本研究采用ID/ICP-MS法建立血清钠测定方法。但钠为单同位素元素，无法得到同位素稀释剂，本实验使用在血清中含量极低且相对廉价的铝(A1)元素作为钠的内标，配制成适当浓度溶液后，分别加入到两份钠标准溶液中，用2％硝酸稀释至铝浓度为4μg/g，钠浓度分别为3.2μg/g5和4.75μg/g的两份标准溶液。未经稀释的血清样品精确加入铝内标后，用69％硝酸简单消解，稀释至铝浓度约为4μg/g的待测样品，以ICP-MS测定两份标准溶液和血清样品的23Na/27Al同位素比值，应用包括法原理计算血清中钠含量。 经方法学考察，应用ICP-MS重复测定两份血清样品各3次，其总变异系数(CV)分别为0.04％和0.06％。用本法分别测定四份血清质控样品加入已知量钠前后的血清钠浓度，其平均回收率分别为99.88％、100.17％、99.89％、100.01％。测定NIST血清标准物质SRM909b两水平血清，钠浓度的总CV分别为0.13％和0.12％，结果与认定值中间值的偏差分别为+0.17％和+0.14％，SRM 956b三水平血清钠浓度的总变异系数分别为0.28％、0.29％和0.27％，结果与认定值中间值的偏差分别为-0.09％、-1.05％和-0.48％。利用本研究建立的ICP-MS法参加了IFCC开展的RELA 2007血清钠的国际比对，其两水平血清样品A、B钠浓度分别为127.25±0.60 mmol/L和140.24±0.54 mmol/L，其总CV分别为0.23％和0.18％。 本研究在国内首次使用电感耦合等离子体质谱(ICP-Ms)技术建立了血清钠的准确测定方法。该方法操作简单快速、准确、精密，有望成为血清钠测定的参考方法。

目录

论文说明：缩略语表

引言

第一部分电感耦合等离子体质谱法测定血清钠分析条件的选择与优化

1.试剂与仪器

1.1化学试剂

1.2血清样品

1.3仪器

1.4标准溶液和内标溶液的配制

2.研究过程、结果与讨论

2.1内标的选择

2.2待测样品浓度的确定

2.3样品前处理方法的考察

2.4电感耦合等离子体质谱仪工作条件的优化

2.5定量方法的选择

2.6测量不确定度分析

第二部分血清钠电感耦合等离子体质谱测定法的建立与方法学考察

1.试剂与仪器

1.1化学试剂

1.2血清样品

1.3仪器

1.4标准溶液和内标溶液的配制

2.血清样品的制备

2.1校准溶液和血清样品的制备

2.2电感耦合等离子体质谱分析

2.3数据分析

3.方法学考察与验证

3.1电感耦合等离子体质谱测定血清钠精密度考察

3.2电感耦合等离子体质谱法测定血清钠回收率的考察

3.3标准物质SRM 909b、SRM 956b准确度实验

第三部分血清钠测定的国际比对——RELA 2007

1.前言

2.试剂与仪器

2.1化学试剂

2.2仪器

2.3标准溶液和内标溶液的配制

2.4比对样品

3.血清样品的测定

3.1预实验

3.2比对血清的测定

3.3测定结果

4.测量不确定度分析

4.1重复测量产生的不确定度

4.2标准溶液产生的不确定度

4.3称量产生的不确定度

4.4合成标准不确定度

4.5测量结果的扩展不确定度

4.6测定结果表达

5.结果

本文结论

参考文献

论文综述同位素稀释质谱法在血清电解质测定及其标准化中的应用

附录 硕士在读期间发表文章

致谢