关节腔内缓释GM--CSF抗体对骨关节炎治疗作用的初步探究

摘要

骨关节炎是常见的退行性关节病变，以进行性软骨破坏、关节内和关节周围组织炎症为主要特征。常见症状包括慢性疼痛，僵硬，畸形，最终会导致关节功能丧失。近些年的研究认为炎症因素和免疫系统在骨关节炎的病理改变过程中发挥了重要的作用。免疫细胞的侵入和炎症相关细胞因子的过量表达是骨关节炎关节内组织的特征之一。调控免疫系统，减轻炎症反应成为骨关节炎治疗新的方向之一。粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)被发现具有激活炎症细胞，刺激炎症相关细胞因子分泌的作用。降低关节炎组织中GM-CSF浓度，被认为可以减弱炎症反应，进而保护关节软骨，减轻骨关节炎症状。 目的： 使用明胶微球作为药物载体，研究关节腔内缓释GM-CSF抗体对骨关节炎的治疗作用。 方法： 1.对实验使用的明胶微球进行体外载药率和释放曲线测定。 2.使用关节腔注射碘乙酸钠（2mg，单次注射）的方式建立大鼠骨关节炎模型。大鼠分为5组：健康组，建模对照组，微球组，抗体组和微球+抗体组。健康组仅注射PBS，建模对照组仅进行建模，其余3组在建模基础上，微球组注射2mg明胶微球，抗体组注射20ug GM-CSF抗体，微球+抗体组注射2mg微球和20ug抗体（注射前完成载药）。治疗注射时间为建模后第2天，注射液体总量均为50ul。在治疗开始第一周末和第二周末，处死大鼠，取建模侧膝关节，脱钙切片后行HE染色，番红-固绿染色和Ⅱ型胶原免疫组化染色实验。对试验结果进行mankin's评分和免疫组化光密度测定。 结果： 1.明胶微球对GM-CSF抗体的载药率为76％，药物释放曲线稳定，在一定时间内实现了较好的缓释效果。 2.建模对照组和微球组切片软骨破坏情况明显，mankin's评分最高，且二者之间没有明显区别(P＞0.05);抗体组和微球+抗体组第一周和第二周的软骨破坏情况优于建模对照组(P＜0.05)，但抗体组第二周软骨破坏较第一周明显加重(P=0.022)。Ⅱ型胶原方面，4组骨关节炎建模组平均IOD均明显低于健康组(P＜0.01)，第一周抗体组和微球+抗体组平均IOD略高于建模对照组和微球组(P＜0.01)，第二周抗体组平均IOD明显下降，和建模对照组无显著差异(P=0.14)，而微球+抗体组仍好于对照组(P＜0.01)。 结论： GM-CSF抗体可以有效延缓骨关节炎的病理改变，对骨关节炎具有较好的治疗作用。以明胶微球为载体，在关节腔内缓释GM-CSF抗体可以在较长时间内实现治疗效果。

目录

摘要

前言

材料与方法

2、实验设备、耗材及其来源

3、实验方法

结果

1．明胶微球缓释大鼠GM-CSF抗体结果

2．大鼠关节腔注射碘乙酸钠进行骨关节炎建模的效果

3．膝关节切片HE染色

4．膝关节切片番红-固绿染色

5．膝关节切片Mankin’s评分

6．膝关节切片Ⅱ型胶原免疫组化和光密度测量

讨论

结论

参考文献

文献综述

附录

致谢

已表论文

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