副溶血弧菌SD--PMA--qPCR活菌检测方法的建立及应用

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摘要

第一章绪论

1研究背景

2活菌检测技术概论

2．1基于活菌培养的检测技术

2．2基于活菌新陈代谢产物的检测技术

2．3基于细胞膜完整性的检测技术

3荧光定量PCR技术原理和分类

3．1原理

3．2实用性

3．3荧光定量PCR方法检测副溶血弧菌的目的基因及其优缺点

4扩增内标的研究概况

4．1建立扩增内标的方法

5 PMA结合荧光定量PCR的应用现状

6．1研究目的

6．2研究内容

参考文献

第二章SD-PMA-qPCR检测副溶血弧菌活菌方法的建立

1．材料与方法

1．1材料和试剂

1．2实验方法

2结果

2．1菌液的计数

2．2特异性试验

2．3PMA处理的优化

2．4SD脱氧胆酸钠的浓度优化

2．5用qPCR、PMA-qPCR、SD-PMA-qPCR3种方法检测副溶血弧菌活菌

2．6SD-PMA-qPCR方法从活死菌混合液中检测副溶血性弧菌活菌

2．7SD-PMA-qPCR的灵敏度分析

3讨论

参考文献

第三章SD-PMA-qPCR检测副溶血弧菌活菌方法的应用

1材料与方法

1．1材料与试剂

1．2实验方法

2结果

2．1添加5×101CFU／g副溶血弧菌活菌人工污染样品实验的检测

2．2添加5×101CFU／g副溶血弧菌活菌和5×107CFU／g副溶血弧菌死菌的混合液人工污染样品实验的检测

2．3添加扩增内标实验

3讨论

参考文献

全文总结

攻读学位期间取得的学术成果目录

致谢