酒萸肉对照提取物制备及应用研究

摘要

目的：　　研究酒萸肉环烯醚萜苷对照提取物制备工艺，并对其在酒萸肉饮片及相关中成药质量控制中应用的可行性进行研究。　　方法：　　以莫诺苷、獐牙菜苷、马鞭草苷、马钱苷的含量为指标，根据单因素试验和正交试验设计筛选出最佳提取工艺；在此基础上，筛选出纯化效果最好的大孔吸附树脂型号，通过考察最佳上样量、洗脱溶剂、洗脱体积等指标，优化大孔树脂和氧化铝柱层析法纯化酒萸肉环烯醚萜苷部位的工艺。　　对酒萸肉对照提取物均匀性和稳定性进行考察。采用酒萸肉对照提取物代替对照品对15批酒萸肉饮片和相关中成药进行薄层色谱鉴别，并确定莫诺苷、獐芽菜苷、马鞭草苷和马钱苷4种成分的含量测定方法。　　结果：　　确定了制备酒萸肉对照提取物最佳工艺为：取酒萸肉饮片加10倍量水，回流提取2次，每次回流时间为2h。提取液浓缩至0.5g生药/mL，加乙醇至含醇量80%，过滤后回收乙醇并将滤液浓缩至浓度为0.5g饮片/mL上样HPD400大孔树脂，吸附流速为1BV/h，每克干HPD400大孔树脂最大吸附量为2.5g生药；先用水洗脱去水溶性杂质，再用2.5BV30%乙醇以2BV/h流速冲洗树脂柱，收集洗脱液，冷冻干燥得酒萸肉粗提物。取适量层析用中性氧化铝（100～200目）装柱，酒萸肉粗提物的上样量为氧化铝用量的1/30，将其溶于少量蒸馏水中上柱，上样后用95乙醇洗脱，洗脱体积为17.5倍柱体积，冷冻干燥后得到酒萸肉环烯醚萜苷对照提取物。　　各批次酒萸肉对照提取物成分含量略有差异，均匀性良好，平均莫诺苷含量41.7%、獐芽菜苷含量3.67%、马鞭草苷含量2.07%、马钱苷含量32.73%，标定后再使用。稳定性实验结果表明对照提取物具有易吸湿性，耐高温，耐光照，应常温，密封保存。　　酒萸肉对照提取物在薄层色谱鉴别和含量测定中应用效果良好。比较了使用对照提取物与化学单体对照品进行环烯醚萜苷含量测定的结果，采用独立样本 t检验，四个成分P值均大于0.05，结果无显著性差异。　　结论：　　采用含量标化的酒萸肉对照提取物为对照，可以替代单体对照品用于酒萸肉饮片及相关中成药质量控制。该对照提取物制备工艺简便易行，效率高，成本低，稳定性好，实现了多指标成分的控制，对酒萸肉的整体质量控制及标准执行具有重要的意义。

目录

前言

第一章 酒萸肉对照提取物制备工艺研究

第一节 酒萸肉饮片的制备和考察

第二节 酒萸肉环烯醚萜苷部位提取工艺考察

第三节 大孔树脂纯化酒萸肉环烯醚萜苷部位工艺研究

第四节 氧化铝柱精制酒萸肉环烯醚萜苷部位工艺研究

第二章 酒萸肉对照提取物均匀性和稳定性研究

1 仪器与材料

2 方法与结果

3 小结和讨论

第三章 酒萸肉对照提取物的应用研究

第一节 酒萸肉饮片及地黄丸系列中成药薄层色谱鉴别

第二节 酒萸肉饮片及地黄丸系列含量测定

第四章 总结与讨论

致谢

参考文献

附录

附图

文献综述:酒萸肉饮片研究进展