声明
第一章 绪论
1.1 蛇足石杉研究进展
1.1.1 蛇足石杉概述
1.1.2 蛇足石杉的药用价值
1.1.3 蛇足石杉的资源分布
1.2 蛇足石杉内生真菌
1.2.1 植物内生真菌概述
1.2.2 植物内生真菌的次生代谢产物
1.2.3 蛇足石杉中内生真菌的研究进展
1.3 阿尔兹海默症及其药物治疗
1.3.1 阿尔兹海默症概述
1.3.2 阿尔兹海默症的药物治疗
1.4 微生物次生代谢产物的分离及鉴定
1.4.1 微生物次生代谢产物的分离方法
1.4.2 微生物次生代谢产物的鉴定
1.5 本研究的目的及意义
第二章 蛇足石杉中产内生真菌的分离及鉴定
2.1 实验材料、试剂及仪器
2.1.1 植物材料
2.1.2 试剂
2.1.3 仪器
2.2 实验方法
2.2.1 培养基及抗生素的配制
2.2.2 蛇足石杉内生真菌的分离及纯化
2.2.3 蛇足石杉内生真菌总DNA的提取
2.2.4 PCR反应
2.2.5 PCR产物的回收
2.2.6 构建系统进化树
2.3 结果与分析
2.3.1 蛇足石杉内生真菌的形态学分析
2.3.2 蛇足石杉内生真菌分离部位
2.3.3 蛇足石杉内生真菌的ITS-rDNA序列分析
2.4 讨论
第三章 产石杉碱甲内生真菌的筛选及其产HupA稳定性分析
3.1 实验材料、试剂及仪器
3.1.1 实验材料
3.1.2 试剂
3.1.3 实验仪器及设备
3.2 实验方法
3.2.1 蛇足石杉内生真菌的发酵培养
3.2.2 内生真菌菌丝中生物碱的提取
3.2.3 高效液相色谱仪检测石杉碱甲的方法
3.2.4 LC-MS检测石杉碱甲的方法
3.2.5 NWUHS001发酵特性的研究
3.3 结果与分析
3.3.1 提物生物碱方法的确定
3.3.2 内生真菌的HPLC检测
3.3.3 内生真菌的LC-MS检测
3.3.4 产石杉碱甲内生真菌的鉴定及保藏
3.3.5 NWUHS001的发酵特性研究
3.3.6 内生真菌的遗传稳定性
3.4 讨论
第四章 NWUHS001 代谢组分的分离及结构鉴定
4.1 实验材料试剂及仪器
4.1.1 实验材料
4.1.2 实验试剂及仪器
4.2 实验方法
4.2.1 体外总生物碱的乙酰胆碱酯酶活性抑制实验
4.2.2 化合物的分离
4.3 结果分析
4.3.1 NWUHS001次生代谢产物抑制乙酰胆碱酯酶实验
4.3.2化合物的分离
4.3.3化合物结构鉴定
4.4 讨论
第五章 Pterosin B的细胞毒活性研究
5.1 实验材料、试剂与仪器
5.1.1 实验材料
5.1.2 实验试剂
5.1.3 实验仪器
5.2 实验方法
5.2.1 细胞复苏
5.2.2 细胞传代
5.2.3 细胞计数
5.2.4 细胞毒活性测定
5.2.5 细胞换液
5.2.6 细胞冻存
5.3 结果与分析
5.3.1 pterosin B细胞实验
5.4 讨论
结论与展望
1 结论
2.后续研究展望
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间取得的科研成果
西北大学;
