纳米孔单分子检测蛋白质磷酸化与碱性磷酸酶活性

目录

第一章 绪论

1.1 纳米孔单分子技术简介

1.2 纳米孔单分子技术发展过程

1.3 纳米孔单分子技术原理

1.4 纳米孔分类

1.5αHL纳米孔简介

1.6αHL纳米孔的应用

1.6.1 核酸检测

1.6.2 蛋白质分析

1.6.3 酶活性和动力学检测

1.7 环糊精

1.7.1 环糊精简介

1.7.2 环糊精在单分子检测的应用

1.8 本论文研究意义及目的

参考文献

第二章 纳米孔无标记检测蛋白质磷酸化

2.1 引言

2.2 实验部分

2.2.1 试剂和材料

2.2.2 主要仪器

2.2.3 实验装置

2.3 实验步骤

2.3.1αHL纳米孔的制备

2.3.2 溶液的配制

2.3.3 平面磷脂双分子层的建立

2.3.4 单通道电流记录

2.3.5 数据处理

2.4 结果与讨论

2.4.1 基于αHL-(M113R)7纳米孔检测磷酸化肽

2.4.2 基于αHL-(M113R)7-am7βCD纳米孔检测磷酸化肽

2.4.3 磷酸化肽和未磷酸化肽的同时检测

2.4.4 磷酸化肽间的区分

2.4.5 纳米传感器的灵敏度测定

2.4.6 实时监测磷酸化肽的脱磷酸化过程

2.5 本章小结

参考文献

第三章 单分子水平检测碱性磷酸酶活性

3.1 引言

3.2 实验部分

3.2.1 实验试剂

3.2.2 主要仪器

3.3 实验步骤

3.3.1αHL纳米孔制备

3.3.2 电解池和电极制备

3.3.3 溶液配制

3.3.4 平面磷脂双分子层建立

3.3.5 单通道电流记录

3.3.6 数据处理

3.4 结果与讨论

3.4.1 PNPP在纳米孔中的信号响应

3.4.2 ALP催化水解PNPP过程的实时监测

3.4.3 ALP活性检测

3.4.4 ALP水解前后紫外测定

3.4.5 拥挤环境对ALP催化速率的影响

3.4.6 金属镁离子对ALP活性的影响

3.4.7 抑制剂筛选

3.5 本章小结

参考文献

结论

攻读硕士学位期间取得的科研成果学术期刊

致谢