声明
缩略语对照表
第一章 绪 论
1.1 抗生素与耐药性
1.2 支链氨基酸
1.2.1 支链氨基酸在生物体内具有重要意义
1.2.2 支链氨基酸与药物靶点筛选
1.3 乙酰羟酸合酶概述
1.4 AHAS 催化作用
1.4.1AHAS 底物谱
1.4.2AHAS 反应及其催化机制
1.5 AHAS 活性测定方法的研究
1.5.1 关于 AHAS 活性检测方法
1.5.2 课题组关于 AHAS 活性检测方法的探索
1.5.3AHAS 催化反应主副产物的推测
1.6 本课题研究意义
第二章 EcAHAS I-CSU 的制备与活性分析
2.1 材料与仪器
2.1.1 菌株和载体
2.1.2 主要实验试剂
2.1.3 主要实验仪器
2.1.4 主要溶液配方
2.2 实验方法
2.2.1 重组质粒的构建
2.2.2 重组蛋白的诱导表达与纯化
2.2.3 重组蛋白的浓度测定
2.2.4 重组蛋白的活性测定
2.2.5 重组蛋白的稳定性考察
2.3 实验结果与讨论
2.3.1 重组质粒的构建结果
2.3.2 重组 EcAHAS I-CSU的表达与纯化结果
2.3.3 重组 EcAHAS I-CSU的浓度检测结果
2.3.4 重组 EcAHAS I-CSU的活性检测结果
2.3.5 重组 EcAHAS I-CSU的稳定性考察结果
2.4 本章小结
第三章柱前衍生-HPLC方法检测重组EcAHAS I-CSU活性
3.1 材料与仪器
3.1.1 主要试剂
3.1.2主要仪器
3.1.3 主要溶液配方
3.2 实验方法
3.2.1 HPLC色谱条件
3.2.2 标准曲线的建立
3.2.3 柱前衍生-HPLC方法检测重组 EcAHAS I-CSU活性
3.2.4 重组 EcAHAS I-CSU稳态动力学参数测定
3.3 实验结果与讨论
3.3.1 标准曲线建立结果
3.3.2 柱前衍生-HPLC方法检测重组 EcAHAS I-CSU活性结果
3.3.3 重组 EcAHAS I-CSU稳态动力学参数测定结果
3.4 小结
第四章 重组EcAHAS I-CSU 催化双底物反应的研究
4.1 材料与仪器
4.1.1主要试剂
4.1.2 主要仪器
4.1.3 主要溶液配方
4.2 实验方法
4.2.1 HPLC色谱条件
4.2.2 标准曲线的建立
4.2.3 EcAHAS I-CSU催化双底物反应的定性与定量检测
4.2.4 EcAHAS I-CSU催化不同比例的双底物反应检测
4.3 实验结果与讨论
4.3.1 标准曲线建立结果
4.3.2 EcAHAS I-CSU催化双底物反应的定性分析结果
4.3.3 EcAHAS I-CSU催化双底物反应的定量分析结果
4.3.4 EcAHAS I-CSU催化不同比例的双底物反应检测结果
4.4 小结
全文总结
参考文献
附录
攻读硕士学位期间取得的科研成果
致谢
西北大学;
