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摘要
第一章绪论
1．1引言
1．2传统方法
1．2．1平板菌落计数法
1．2．2其他方法
1．3免疫学方法
1．3．1酶联免疫吸附法
1．3．2免疫胶体金侧向层析法
1．3．3免疫荧光检测法
1．3．4免疫磁珠技术
1．4分子生物学方法
1．4．1聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction，PCR)
1．4．2环介导等温扩增技术
1．4．3生物芯片技术
1．4．4基因探针技术
1．5本文的研究目的及研究内容
1．5．1研究目的
1．5．2研究内容
第二章基于PCR的空肠弯曲菌毒力基因检测方法
2．1引言
2．2实验主要试剂材料和仪器
2．2．1实验主要试剂材料
2．2．2实验所用主要仪器设备
2．3实验方法
2．3．1细菌样液的制各
2．3．2 MNPs提取细菌基因组DNA
2．3．3 DNA提取过程中MNPs量的优化
2．3．4 DNA提取过程中吸附缓冲液浓度的优化
2．3．5与传统方法提取效果的比较
2．3．6 PCR扩增及电泳
2．3．7退火温度的优化
2．3．8镁离子浓度的优化
2．3．9引物浓度的优化
2．3．10灵敏度的检测
2．3．11特异性的检测
2．4结果与讨论
2．4．1 MNPs添加量的优化
2．4．2吸附缓冲液中PEG浓度的优化
2．4．3与传统方法提取效果的比较
2．4．4退火温度的优化
2．4．5镁离子浓度的优化
2．4．6引物浓度的优化
2．4．7灵敏度的检测
2．4．8特异性的检测
2．5本章小结
第三章基于胶体金标记的侧向层析空肠弯曲菌毒力基因检测研究
3．1检测原理
3．2实验主要试剂材料和仪器
3．2．1实验主要试剂材料
3．2．2实验主要仪器设备
3．3实验方法
3．3．1金纳米粒子(GNPs)的制备及表征
3．3．2地高辛抗体标记的金纳米粒子(Dig-GNPs)的制备
3．3．3 C．jejuni检测胶体金试纸条的制备
3．3．4样品的准备
3．3．7 Dig-GNPs制备过程中重悬液种类的优化
3．3．8胶体金标记的C．jejuni毒力基因的单重检测
3．3．9胶体金标记的C．jejuni毒力基因的交叉验证
3．3．10胶体金标记的C．jejuni毒力基因的多重检测
3．3．11特异性的检测
3．3．12实际样品的检测
3．4结果与讨论
3．4．1 GNPs和Dig-GNPs的制备及表征
3．4．2最适标记抗体量的确定
3．4．3 Dig-GNPs制备过程中封闭剂种类的优化
3．4．4 Dig-GNPs制备过程中重悬液种类的优化
3．4．5胶体金标记的C．jejuni毒力基因的单重检测
3．4．6胶体金标记的C．jejuni毒力基因的交叉验证
3．4．7胶体金标记的C．jejuni毒力基因的多重检测
3．4．8特异性的检测
3．4．9实际样品的检测
3．5本章小结
第四章基于量子点标记的侧向层析空肠弯曲菌毒力基因检测研究
4．1检测原理
4．2实验主要试剂材料和仪器
4．2．1实验主要试剂材料
4．2．2实验主要仪器设备
4．3实验方法
4．3．1 CdSe量子点(QDs)的制备及表征
4．3．2 CdSe量子点的纯化
4．3．6 mapA检测过程中标记抗体量的优化
4．3．7 mapA检测过程中重悬液种类的优化
4．3．8 mapA检测样品稀释液中加入阻断剂浓度的优化
4．3．9 cdtB检测过程中QDs浓缩倍数的确定
4．3．12 QDs标记的C．jejuni毒力基因的单重检测
4．3．13量子点标记的C．jejuni毒力基因的交叉验证
4．3．14量子点标记的C．jejuni毒力基因的多重检测
4．3．15特异性的检测
4．3．16实际样品的检测
4．4结果与讨论
4．4．1 QDs和Dig-QDs的制备及表征
4．4．2 mapA检测过程中标记抗体量的优化
4．4．3 mapA检测过程中重悬液种类的优化
4．4．4 mapA检测样品稀释液中加入阻断剂浓度的优化
4．4．5 cdtB检测过程中量子点浓缩倍数的确定
4．4．6 cdtB检测过程中封闭剂种类的优化
4．4．7 cdtB检测样品稀释液pH的标定
4．4．9 QDs标记的C．jejuni毒力基因的交叉验证
4．4．10 QDs标记的C．jejuni毒力基因的多重检测
4．4．11特异性的检测
4．4．12实验样品的检测
4．5本章小结
参考文献
攻读硕士学位期间的学术活动及成果情况
