H9N2流感病毒与绿脓杆菌共感染致水貂出血性肺炎的病程演化研究

目录

声明

符 号 说 明

前言

1.1病毒-细菌共感染

1.1.1病毒-细菌共感染的研究进展

1.1.2共感染的致病机制

1.2 H9N2流感病毒的研究进展

1.2.1 病原学

1.2.2流行病学

1.2.3致病机制

1.3绿脓杆菌的研究进展

1.3.1病原学

1.3.2流行病学

1.3.3致病机制

1.4水貂共感染的研究进展

1.4.2水貂感染绿脓杆菌的情况

1.4.3水貂感染流感的情况

1.4.4水貂共感染的概况

1.5目的与意义

2材料与方法

2.1材料

2.1.1病毒和细菌

2.1.2血清

2.1.3鸡胚

2.1.4实验动物

2.1.5仪器和试剂

2.1.6引物设计

2.2方法

2.2.1病毒的EID50测定

2.2.2细菌悬液的制备

2.2.3 H9N2 IAV的HA基因荧光定量PCR（qRT-PCR）检测方法的建立

2.2.4 绿脓杆菌攻毒剂量的选择

2.2.5共感染水貂的致病性试验

2.2.6统计分析

3 结果

3.1 病毒的EID50测定

3.2 细菌悬液的制备

3.3 H9N2 IAV的HA基因qRT-PCR检测方法的建立

3.3.1 荧光定量PCR引物特异性

3.3.2 荧光定量PCR反应条件的优化

3.3.3 荧光定量PCR检测HA基因标准曲线的建立

3.3.4 荧光定量PCR反应特异性试验结果

3.3.5 荧光定量PCR反应敏感性试验结果

3.3.6 荧光定量PCR反应重复性试验结果

3.4 绿脓杆菌攻毒剂量的选择

3.5 水貂共感染试验结果

3.5.1 临床体征

3.5.2 共感染加剧了肺组织病理学病变

3.5.3 共感染导致肺组织更明显的细胞凋亡

3.5.4 排毒结果

3.5.5 H9N2病毒在水貂中的分布与载量

3.5.6 肺中绿脓杆菌的清除延迟

3.5.7 抗H9N2抗体效价

3.5.8 细胞因子测定

4 讨论

5 结论

参考文献

致谢

攻读学位期间发表论文情况