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转录因子SlMYC2在MeJA介导的番茄果实品质及抗性中的作用及其超表达载体的构建

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英文缩略词表

第一章 引言

1.1茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)的结构与理化性质

1.2 MeJA在果蔬采后品质形成及抗性中的调控作用研究

1.2.1 改善果蔬品质

1.2.2 诱导果蔬产生抗病性

1.2.3 降低果实的冷害

1.3 MeJA调控果蔬采后品质的机制研究

1.3.1 诱导果蔬基因的表达

1.3.2 诱导抗氧化相关酶的活性

1.3.3 诱导抗病相关酶的活性

1.3.4 促进抗性物质的积累

1.3.5 改善果蔬的能量代谢

1.4 转录因子MYC2的研究进展

1.4.1 转录因子MYC2的结构

1.4.2 转录因子MYC2在JA信号途径中的作用

1.5 研究的目的与意义

第二章 MeJA处理对番茄果实采后品质的影响

2.1 材料与试剂

2.1.1 果实材料

2.1.2 实验仪器和试剂

2.2 实验方法

2.2.1 色差测定

2.2.2 硬度测定

2.2.3 番茄红素含量的测定

2.2.4 总酚含量的测定

2.2.5 可溶性固形物(TSS)含量的测定

2.2.6 可滴定酸(TA)含量的测定

2.2.7 抗坏血酸含量的测定

2.2.8 超氧阴离子(O2 )产生速率的测定

2.2.9 H2O2含量的测定

2.2.10 抗氧化相关酶活性的测定

2.2.11 可溶性蛋白含量的测定

2.2.12 总抗氧化能力的测定

2.2.13 总黄酮含量的测定

2.2.14 还原型谷胱甘肽(GSH)含量的测定

2.2.15 电导率的测定

2.2.16 数据分析

2.3 结果分析

2.3.1 番茄果实色差的变化

2.3.2 番茄果实硬度的变化

2.3.3 番茄果实可溶性固形物含量、可滴定酸含量和固酸比变化

2.3.4 番茄果实中番茄红素含量的变化

2.3.5 番茄果实总酚和抗坏血酸含量的变化

2.3.6 番茄果实中超氧阴离子(O2 )产生速率的变化

2.3.7 番茄果实中H2O2含量的变化

2.3.8 番茄果实中SOD、POD、CAT和APX活性的变化

2.3.9 番茄果实中还原型谷胱甘肽(GSH)含量的变化

2.3.10 番茄果实总抗氧化能力的变化

2.3.11 番茄果实中总黄酮含量的变化

2.3.12 番茄果实电导率的变化

2.4 讨论

2.5 小结

第三章 MeJA处理对番茄果实抗性品质的影响

3.1 材料与试剂

3.1.1 果实材料

3.1.2 实验仪器和试剂

3.1.3 试剂的配置

3.2 实验方法

3.2.1 病斑直径和发病率的统计

3.2.2 PAL活性的测定

3.2.3 PPO活性的测定

3.2.4 GLU活性的测定

3.2.5 CHI活性的测定

3.2.6 α-番茄碱含量的测定

3.2.7 CTAB法提取番茄果实中的总RNA

3.2.8 番茄果实中第一链cDNA的合成

3.2.9 实时定量PCR (qRT-PCR)测定抗病相关基因表达量

3.2.10 数据分析

3.3 结果分析

3.3.1MeJA处理对Botrytis cinerea接种的番茄果实发病率和病斑直径的影响

3.3.2 MeJA对番茄果实中PAL和PPO活性的影响

3.3.3 MeJA处理对番茄果实中对CHI和GLU的活性的影响

3.3.4 MeJA处理对番茄果实中α-番茄碱含量的影响

3.3.5 MeJA处理对番茄果实中SlPR1,SlPR2a,SlPR2b,SlPR3a和SlPR3b表达量的影响

3.4 讨论

3.5 小结

第四章 转录因子SlMYC2在MeJA介导番茄果实抗病性中的调控作用

4.1 实验材料与仪器试剂

4.1.1 果实材料

4.1.2 菌株材料

4.1.3 实验仪器

4.1.4 实验试剂

4.1.5 试剂配置方法

4.2 实验方法

4.2.1 转录因子SlMYC2对MeJA处理的响应

4.2.2 SlMYC2沉默对MeJA介导的番茄果实抗性的影响

4.2.3 数据分析

4.3 结果分析

4.3.1 SlMYC2对MeJA的响应

4.3.2 SlMYC2沉默对MeJA介导的番茄果实抗病性的影响

4.4 讨论

4.5 小结

第五章 SlMYC2超表达载体的构建及其对果实品质的影响

5.1 实验材料与仪器试剂

5.1.1 植物材料

5.1.2 菌株材料

5.1.3 试剂

5.1.4 实验仪器

5.1.5 试剂配制

5.2 实验方法

5.2.2 SlMYC2目的基因的扩增

5.2.3 SlMYC2目的基因的回收和纯化

5.2.4 XbaI和SacI双酶切目的基因和质粒pCAMBIA1300

5.2.3。5.2.5 双酶切产物连接

5.2.6 重组载体pCAMBIA1300-SlMYC2转化大肠杆菌DH5α

5.2.7 重组载体pCAMBIA1300-SlMYC2菌液PCR验证

5.2.8 重组载体pCAMBIA1300-SlMYC2质粒提取

5.2.9 重组载体pCAMBIA1300-SlMYC2质粒双酶切验证

5.2.10 重组载体pCAMBIA1300-SlMYC2质粒转农杆菌EHA105

5.2.11 农杆菌菌液PCR验证

5.2.12 农杆菌侵染液的制备与侵染

5.2.13 超表达番茄果实相关指标的测定

5.2.14 数据分析

5.3 结果分析

5.3.1 番茄果实中的RNA

5.3.2 SlMYC2目的基因的扩增

5.3.3 SlMYC2目的基因的回收和纯化

5.3.4 SlMYC2目的基因和载体双酶切

5.3.5 重组载体pCAMBIA1300-SlMYC2双酶切

5.3.6 农杆菌菌液PCR验证

5.3.7 SlMYC2基因表达量的分析

5.3.8 SlMYC2超表达对番茄果实品质的影响

5.4 讨论

5.5 小结

第六章 结论与展望

6.1 结论

6.2 展望

参考文献

在读期间公开发表的论文

致谢

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著录项

  • 作者

    崔席席;

  • 作者单位

    山东理工大学;

  • 授予单位 山东理工大学;
  • 学科 食品科学与工程
  • 授予学位 硕士
  • 导师姓名 张新华;
  • 年度 2019
  • 页码
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类
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