鸡耐热性评价与热应激状态下肝脏基因表达谱研究

摘要

热应激是影响鸡生产性能的重要应激因子，提高鸡的耐热性能是热带地区和我国南方地区育种目标之一。本研究以体重相近(1.65±0.13 kg)的Anak 40混合家系母鸡(n=55)为试验材料，61-65日龄置于24-28℃、RH50％的环境进行预饲，66日龄室温快速提升至(35±1)℃，并以此时作为热应激起始(0 h)。0、6、18、30、42、54和66h时测定每只母鸡的直肠温度。66h时快速升温至(41±1)℃，记录每只母鸡热死亡时间(HSST)和热致死温度(LRT)。各时间点直肠温度和热致死温度与起始直肠温度的差值分别记为△Tn（△T6、△T18、△T30、△T42、△T54、△T66）和△TT。结果表明，HSST与△T18和△TT均呈显著负相关(r△T18=-0.277，r△TT=-0.314；P<0.05)，而与△T30、△T42和△T54均呈极显著负相关(r△T30=-0.362，r△T42=-0.385，r△T54=-0.559；P<0.01)。同时，△T18较小（平均数-1/2标准差）的母鸡的HSST(256.0±208.4 min)显著(P<0.05)高于大于△T18较大（平均数+1/2 标准差）的母鸡(123.7±78.3min)。因此，△T18作为鸡耐热力的评价指标是可行的。
　　 从60日龄的Anak40同胞家系中随机选择12只母鸡，分为三组（G1，G2，G3），每组4只，同一鸡舍饲养，环境温度(25±1)℃。G1组作为对照组，G2组为(35±1)℃热应激24h，G3组为热应激24h后恢复至对照组温度并持续24h。分别取肝脏组织，提取12个样本的RNA 并进行芯片杂交，获得12张44K的安捷伦全基因组表达谱芯片。结果表明，有235条基因表达发生2倍以上变化。对这些基因进行基因本体(geneontology)信息生理功能(biological process)分类，共分为16类。其中14条基因与DNA代谢有关 (DNAmetabolic process，6 ；DNAreplication，5；transcription,DNA-dependent，3)，8条基因与刺激应答相关 (response to monosaccharide stimulus，2；response to glucose stimulus，2；response to carbohydrate stimulus，2；response tohexose stimulus，2)，7条基因与代谢相关 (monosaccharide metabolic process，4；fattyacid metabolic process，3)，5条基因与生物合成相关 (RNA biosynthetic process，3；regulation of receptor biosynthetic process，2)，6条修正基因(histone modification，3；covalent chromatin modification，3)，其他基因9条(chromosome organization，5；histoneH3 acetylation，2；organelle fusion，2)。去掉重复基因，共有16条。KEGG Pathway分析可将差异表达基因分为4类：Galactose metabolism、Glycolysis /Gluconeogenesis、Pyruvate metabolism、Glycerolipid metabolism，共8条基因。HSP基因家族中，只有HSP60表达量发生2倍以上的表达(2.35，P<0.05)。
　　 综上，本研究获得一个鸡耐热性的评价指标，锁定鸡耐热性相关的候选基因23条，为进一步研究热应激遗传机制及分子标记奠定基础。

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1 材料与方法

2 结果与分析

3 讨论

4 结论

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致 谢

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