藻蓝蛋白亚基光动力作用效果及在体内分布规律的研究

摘要

光动力学疗法(PDT)作为一种新型医疗手段，在多种疾病的治疗过程中起到了越米越重要的作用，特别是对部分肿瘤的治疗效果明显。藻蓝蛋白(C-PC)为螺旋藻中重要的捕光蛋白，由a及β亚基组成。本实验研究表明，C-PC亚基可以在4小时内渗透到火部分的细胞中。当给予22.32 J/cm<'2>的照射强度时，C-PC 亚基介导的PDT对所检测的COS7、C6、S180、SP2/0等细胞有较好的抑制作用，抑制率分别达到17.8％、26.2％、33.8％及78.6％。 本文还系统地研究了 C-PC 亚基在小鼠和胎鼠代谢分布的情况：在成年小鼠内，C-PC亚基主要分布在胃、小肠、上皮代谢旺盛的部分，但不能通过血脑屏障；对于胎鼠来说，C-PC亚基比较容易通过胎盘屏障进入胎鼠体内，且代谢分布与成年小鼠分布相似。

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声明

绪论

第一章藻蓝蛋白亚基的制备与鉴定

1.1.藻蓝蛋白C-PC的提取

1.1.1实验材料与试剂

1.1.2细胞粗提

1.1.3过柱纯化

1.2..考马斯亮蓝法测蛋白质浓度

1.2.1制作标准曲线

1.3聚丙烯酰胺法(PAGE)检测藻蓝蛋白亚基含量

1.3.1试剂和器材

1.3.2操作方法

1.4藻蓝蛋白亚基的提取

第二章藻蓝蛋白亚基对细胞渗透作用特征研究

2.1实验材料与仪器

2.1.1实验材料

2.1.2实验仪器

2.2试剂配制

12％的重铬酸钾强酸洗液

1000×抗生素溶液的配制

RPMI-1640培养液的配制

DMEM培养基的配制

0.25％胰酶(1:125)的配制

2.3实验方法

2.3.1细胞培养方法

2.3.2 C-PC亚基在细胞渗透的实验方法

2.4结果与讨论

第三章藻蓝蛋白亚基介导PDT对细胞抑制作用

3.1实验材料与仪器

3.1.1实验材料

3.1.2实验仪器

3.2实验方法

3.2.1MTT法检测C-PC介导的PDT对细胞的抑制作用

3.3结果

3.3.1藻蓝蛋白α亚基与a/β亚基介导的PDT对SP2/0影响的比较。

3.3.2藻蓝蛋白亚基介导的PDT在不同的照射剂量下对SP2/0细胞存活率的影响。

3.3.3藻蓝蛋白α亚基介导的PDT对COS7、C6、S180细胞存活率的影响。

3.4讨论

第四章藻蓝蛋白亚基在小鼠体内代谢分布研究

4.1.实验材料仪器

4.1.1.实验材料

4.2.2.实验仪器

4.2.实验方法

实验前处理

小鼠尾静脉注射

小鼠解剖

4.3结果与讨论

4.3.1藻蓝蛋白亚基在小鼠各脏器的分布情况

4.3.2藻蓝蛋白亚基在小鼠体内潴留时间

4.3.3藻蓝蛋白亚基在胎鼠体内的分布情况。

总结

参考文献

致 谢

攻读学位期间发表的学术论文