冷热交替热物理治疗引起小鼠乳腺癌抗肿瘤免疫响应研究

摘要

本研究将冷冻结合温热的热物理治疗方法应用于小鼠4T1扩散型乳腺癌模型中,评价了其疗效并检测了冷热处理后机体产生的抗肿瘤免疫响应。结果表明,对于体内已有微转移的小鼠,常规手术切除原位肿瘤无法治愈小鼠,但经过冷热交替治疗后,17只小鼠中有15只得到完全治愈,而单独冷疗或热疗则无法产生这样的疗效。同时,相同的冷热治疗参数却完全无法治愈带有4T1肿瘤的裸鼠;病理切片分析结果显示,冷热处理后原位肿瘤区域仍然有活性肿瘤细胞残留;对治愈小鼠进行二次接种试验发现小鼠对4T1肿瘤产生了抵抗力,以上结果均显示,对于肿瘤的直接杀伤作用并不是冷热交替热物理治疗产生较好疗效的唯一机制。同时,本研究对冷热处理后,小鼠机体的免疫水平进行了检测。分别通过体外细胞毒反应测定、ELISA及免疫组化等方法发现,相比于手术切除,冷热处理后小鼠体内脾细胞对4T1肿瘤的细胞毒响应较强,且血清中Th1型细胞因子的含量存在显著上升。另一方面,对原位肿瘤进行冷热处理后,T淋巴细胞对于肿瘤区域的渗入量相比处理前大大上升。以上结果都显示了冷热交替治疗能够激发机体产生较强的抗肿瘤的免疫响应。在未来的工作中,我们将会对其中免疫响应的具体机制进行更加深入的研究。

目录

摘要

ABSTRACT

第一章 乳腺癌治疗中的温热治疗和冷疗

1.1 温热治疗和冷疗

1.2 冷热治疗中的抗肿瘤免疫响应

1.2.1 机体抗肿瘤免疫响应的主要机制

1.2.2 热休克蛋白——温热治疗中产生免疫响应的主要因素

1.2.3 颇有争议的冷疗后机体抗肿瘤免疫响应

1.3 冷热协同疗法的提出

1.4 研究中所用的动物乳腺癌模型

1.5 论文的工作设想和内容

参考文献

第二章 冷热交替在小鼠扩散型乳腺癌模型中的疗效评价

2.1 引言

2.2 实验方法和材料

2.2.1 实验中所使用的动物、细胞系及试剂

2.2.2 仪器

2.2.3 BALB/c 小鼠中 4T1 扩散型乳腺癌模型的建立及肿瘤大小的测定

2.2.4 冷热治疗及手术切除

2.2.5 使用BCS 196 冷台对冷热交替实验进行定量重复

2.2.6 对整个冷热交替治疗过程中的温度场分布进行数值模拟

2.3 实验结果

2.3.1 对整个冷热治疗过程温度场模拟的计算结果

2.3.2 冷热交替治疗疗效的评价

2.4 分析与讨论

参考文献

第三章 冷热交替治疗引起抗肿瘤免疫响应的研究

3.1 引言

3.2 实验方法和材料

3.2.1 动物、细胞系及试剂

3.2.2 仪器

3.2.3 免疫缺陷小鼠肿瘤模型的冷热交替治疗

3.2.4 冷热交替治愈鼠的二次接种实验

3.2.5 冷热交替处理后原位肿瘤的病理及免疫组化观察

3.2.6 体外细胞毒反应测定

3.2.7 小鼠血清中Th1 型细胞因子的测定

3.2.8 数据统计

3.3 实验结果

3.3.1 冷热交替治疗在免疫缺陷机体中的效果

3.3.2 冷热治疗后原位肿瘤的病理分析

3.3.3 冷热交替治疗后小鼠体内抗肿瘤免疫响应

3.4 分析及讨论

参考文献

总结和展望

致谢

攻读硕士学位期间已发表或待发表的有关论文