声明
摘要
1 前言
1.1 研究背景
1.2 花色苷概述
1.2.1 花色苷的化学结构和种类
1.2.2 花色苷的稳定性
1.2.3 花色苷的生理功能
1.2.4 花色苷研究的发展趋势
1.3 蓝莓花色苷
1.3.1 蓝莓概述
1.3.2 蓝莓的保健功能
1.3.3 蓝莓花色苷概述
1.4 DNA损伤
1.5 紫外辐射对DNA结构影响的研究现状
1.6 天然抗氧化剂对DNA保护的现状
1.7 本课题研究目的及意义
2 材料与方法
2.1 材料
2.1.1 实验材料
2.1.2 主要试剂
2.1.3 仪器与设备
2.1.4 主要试剂配制
2.2 试验方法
2.2.1 蓝莓花色苷的提取
2.2.2 花色苷的纯化
2.2.3 蓝莓花色苷分析鉴定
2.2.4 HepG2细胞的培养
2.2.5 MTT法检测紫外辐射对HepG2细胞存活率的影响
2.2.6 蓝莓花色苷对紫外造成HepG2细胞损伤的保护作用的研究
2.2.7 统计学方法
3 结果与讨论
3.1 蓝莓花色苷提取
3.1.1 蓝莓花色苷最大吸收波长的确定
3.2 AB-8大孔树脂对蓝莓花色苷的纯化
3.2.1 吸附时间的测定
3.2.2 解吸时间的测定
3.2.3 pH值对AB-8大孔树脂吸附的影响
3.2.4 乙醇浓度对AB-8树脂解吸的影响
3.2.5 大孔树脂纯化蓝莓花色苷的吸附流速的选择
3.2.6 大孔树脂纯化蓝莓花色苷的洗脱流速的选择
3.2.7 花色苷含量的测定
3.3 蓝莓花色苷分析鉴定
3.3.1 蓝莓花色苷红外光谱图分析
3.3.2 蓝莓花色苷质谱分析
3.4 MTT法检测紫外辐射对HepG2细胞存活率的影响
3.5 蓝莓花色苷对UV造成HepG2细胞损伤保护作用的研究
3.5.1 MTT法检测蓝莓花色苷对HepG2细胞的影响
3.5.2 MTT法检测细胞增殖活性
3.5.3 电镜观察细胞形态学改变
3.5.4 Hoechst33258染色观察细胞核形态学改变
3.5.5 彗星试验检测蓝莓花色苷对UV诱导的HepG2细胞DNA损伤的保护
3.5.6 蓝莓花色苷对UV辐照HepG2细胞活性氧自由基的清除作用
3.5.7 细胞周期分析DNA含量
3.5.8 蓝莓花色苷对紫外辐射HepG2细胞线粒体跨膜电位检测
3.5.9 免疫荧光检测γH2AX
3.5.10 蓝莓花色苷对UV损伤HepG2细胞的p53,p21,Gadd45,MDM2 mRNA表达的影响
3.5.11 蓝莓花色苷对UV损伤HepG2细胞的p53、p-p53、p21、Gadd45、MDM2蛋白表达的影响
4 结论
5 展望
参考文献
7 攻读硕士期间发表的论文
致谢