IFN-γ诱导胰腺癌细胞RFXAP基因表达上调及其机制研究

摘要

目的：
　　已有研究表明IFN-γ能够促进多种细胞MHCⅡ类分子的表达。RFXAP是MHCⅡ类分子的重要转录因子。然而RFXAP在IFN-γ的调节体系中的表达情况仍不明确。此次实验我们将首次探索在胰腺癌细胞中RFXAP如何在IFN-γ上调MHCⅡ类分子机制中起着关键作用。
　　方法：
　　通过qPCR证明在IFN-γ的刺激下，随着IFN-γ刺激时间的延长和浓度的增加，miR-212-3p的改变情况;western blot验证 IFN-γ的刺激下RFXAP和MHC classⅡ分子的表达情况;荧光素梅和转染实验证实miR-212-3p和RFXAP基因之间的标靶关系。并且进一步实验证明，IFN-γ刺激miR-212-3p mimics转染后的胰腺癌细胞RFXAP和MHC classⅡ表达情况。
　　结果：
　　随着IFN-γ时间的延长和浓度的增加，miR-212-3p显著下调;同时RFXAP和MHC classⅡ分子的表达明显上调;并且荧光素梅和转染实验证实RFXAP是miR-212-3p的靶基因。进一步实验证明，IFN-γ刺激miR-212-3p mimics转染后的胰腺癌细胞不能导致RFXAP和MHC classⅡ表达升高。
　　结论：
　　我们认为IFN-γ通过抑制miR-212-3p的表达从而诱导MHC classⅡ分子的表达上调，其中RFXAP是miR-212-3p的直接靶基因。此外，作为一种转录因子，RFXAP在肿瘤细胞中的作用还未见报道，我们研究首次发现在胰腺癌细胞中IFN-γ能够促进RFXAP基因的表达，这为研究IFN-γ治疗肿瘤作用及RFXAP在肿瘤中的功能研究提供了新的思路。

目录

声明

致谢

摘要

缩略词表

1 前言

2 材料与方法

2．1 材料

2．2 方法

3 结果

3．1 IFN-γ抑制人胰腺癌细胞系miR-212-3p的表达

3．2：双荧光素酶报告载体实验证实RFXAP是miR-212-3p的靶基因

3．3：miR-212-3p靶向调节Panc-1细胞内RFXAP蛋白表达

3．4 IFN-γ促进人胰腺癌Panc-1细胞系RFXAP和MHCⅡ的表达

3．5：IFN-γ不能促进转染miR-212-3p mimics后的Panc-1细胞表达RFXAP和MHCⅡ

4 讨论

5 结论

参考文献

综述 干扰素-γ在肿瘤治疗中的作用

作者简介