内皮素对反刍动物生长激素释放肽分泌影响的研究

摘要

生长激素释放肽(Ghrelin)具有促进机体生长和增加食欲的作用，我们之前的研究证明内皮素(Endothlin, ET)能够升高血浆Ghrelin水平，但是ET上调Ghrelin水平的受体亚型尚不清楚。本研究通过在体注射试验和免疫组化方法探究上调Ghrelin水平的ET受体亚型，以期为反刍动物Ghrelin的调控机制提供理论依据。
　　为了解ET-1和ET-3对反刍动物基本生命体征和生理生化指标的影响，按照不完全拉丁方试验设计给绵羊分别一次性静脉注射0.1％牛血清白蛋白(BSA)生理盐水（对照组）、0.7 nmol/kgET-1(ET-1组)和0.7 nmol/kg ET-3(ET-3组)。结果显示，同对照组相比ET-1组和ET-3组羊心率显著减慢(P＜0.05)，血糖含量、红细胞总数、血红蛋白含量和红细胞比容值均显著升高(P＜0.05)，且ET-1较ET-3的作用效果强，持续时间长。而注射ET-1和ET-3后对羊的呼吸频率、白细胞总数及分类计数和血浆蛋白浓度的变化同对照组比差异不明显(P＞0.05)。
　　为探究介导ET促进Ghrelin分泌的内皮素受体亚型，采用完全拉丁方试验设计给牛分别一次性静脉注射0.1％ BSA生理盐水（对照组）、（0.1μg/kg、0.4μg/kg、0.7μg/kg和1.0μg/kg）ET-3、2.0μg/kg IRL1620(ET-B受体激动剂)、20.0μg/kg[D-Lys3]-GHRP-6（GHS-R受体阻断剂）以及1.0μg/kg ET-3+20.0μg/kg[D-Lys3]-GHRP-6。结果显示，ET-3剂量依赖性地升高牛血浆酰基化Ghrelin和总Ghrelin水平(P＜0.05),IRL1620具有同ET-3相同的作用;[D-Lys3]-GHRP-6未能阻断ET-3对酰基化Ghrelin和总Ghrelin的影响（P＞0.05）。
　　为探究内源性Ghrelin的内分泌细胞上是否存在ET受体的分布，采用免疫组化的方法，用兔抗酰基化Ghrelin抗体在羔羊皱胃底部腺体定位到Ghrelin免疫阳性细胞。用兔抗ET-A受体和兔抗ET-B受体抗体初步在羊皱胃底部弥散性地定位到ET-A和ET-B受体免疫活性物质，尤其是在胃底部腺体颈部和底部腺腔以及黏膜肌层的染色较深。
　　本研究结果提示，ET通过ET-A受体介导降低反刍动物心率，升高血液红细胞相关指标的作用;ET-B受体可能参与介导ET促进Ghrelin分泌的作用。

目录

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论文说明

摘要

英文缩略词表

第1章 绪论

1．1 内皮素的研究进展

1．2 本研究的目的及意义

第2章 ET-1和ET-3对羊血液生理生化指标的影响

2．1 材料和方法

2．2 结果和分析

2．3 讨论

2．4 小结

第3章 促进Ghrelin分泌的内皮素受体亚型的研究

3．1 材料和方法

3．2 结果和分析

3．3 讨论

3．4 小结

第4章 Ghrelin和内皮素受体亚型的组织学定位

4．1 材料与方法

4．2 结果和分析

4．3 讨论

4．4 小结

第5章 结论

参考文献

附录

致谢

作者简介