生物大分子与有机小分子相互作用的荧光法研究

摘要

荧光光谱法作为一种重要的现代仪器分析方法，它具有灵敏度高、选择性强、用量少、方法简便、信息多样等优点，因而被广泛应用于化学、生物学、药学、医学、环境科学等领域。本文提出以巴比妥、酞紫、甲基百里酚蓝和达旦黄为荧光探针，研究结果表明： 1.采用荧光光谱法分别研究了巴比妥、酞紫与牛血清白蛋白相互作用的特点，实验发现巴比妥、酞紫对牛血清白蛋白均有较强的荧光猝灭作用。利用荧光猝灭理论，分别研究了巴比妥、酞紫对牛血清白蛋白的猝灭机理，测定了两个反应体系的结合常数、结合位点数及热力学参数△G、△H和△S，根据热力学参数和离子强度实验确定了两者的作用力类型。采用同步荧光技术分别考察了巴比妥、酞紫对牛血清白蛋白构象的影响。 2.采用荧光光谱法和紫外—可见吸收光谱法分别研究了甲基百里酚蓝、达旦黄与牛血清白蛋白结合反应的特征。实验发现：甲基百里酚蓝、达旦黄对牛血清白蛋白均有较强的荧光猝灭作用，根据荧光猝灭数据，由Stern-Volmer方程和Lineweaver-Burk双倒数方程得到了反应的结合常数和热力学参数，并由此推出了结合反应的主要作用力类型。在此基础上依据Forester非辐射能量转移理论，分别探讨了甲基百里酚蓝、达旦黄与牛血清白蛋白相互结合时，给体—受体间的距离和能量转移效率。从而证实了反应为静态猝灭过程，且阐明了其猝灭机制是通过能量转移产生的。 3.对达旦黄与DNA的结合反应进行荧光光谱法、紫外光谱法等方面的研究，结果表明：在pH=7.4的溶液中达旦黄与DNA的双螺旋碱基对之间存在嵌插作用和静电力作用。基于在达旦黄中加入DNA后，达旦黄的荧光被猝灭，建立了达旦黄测定DNA的新方法。在最佳实验条件下，DNA的线性范围为0～5.527×10-4mol/L，最低检测限为2.221×10-5mol/L。

目录

文摘

英文文摘

独创性声明及关于论文使用和授权的说明

1绪论

2巴比妥与牛血清白蛋白相互作用的荧光光谱法研究

3酞紫与牛血清白蛋白相互作用的荧光法研究

4甲基百里酚蓝与牛血清白蛋白相互作用的荧光法研究

5达旦黄与牛血清白蛋白相互作用的荧光光谱法研究

6达旦黄与DNA相互作用的荧光法研究

结 论

致 谢

参考文献

攻读硕士学位期间发表的论文及科研成果