多糖对齐口裂腹鱼肌肉品质、脂质代谢及HSP70基因表达的影响

摘要

目的:研究氧化魔芋葡甘露聚糖(Oxidized Konjac Glucomannan，OKGM)及RS4型抗性淀粉(Resistant Starch，RS)对齐口裂腹鱼生长、肌肉品质、脂质代谢及热休克蛋白70（HSP70）mRNA表达的影响，旨在为OKGM及RS4型抗性淀粉在水产饲料中的合理应用提供理论依据。
　　方法:选取平均质量为87.58±5.16g的健康齐口裂腹鱼540尾，随机分为6组，每组3个重复，每个重复30尾。试验在基础饲料中各组分别添加0％OKGM及RS4(C)、0.8％OKGM(OKGM0.8)、1.6％ OKGM(OKGM1.6)、3.2％OKGM(OKGM3.2)、1.6％RS4(RS1.6)、3.2％RS4(RS3.2)，饲喂60d后，测定其饵料系数(FC)、特定生长率(SGR)、体长/体高、肝体比(HSI)、肥满度(CF)、肠脂比;肌肉基本成分、pH、失水率、氨基酸、电子舌;肝胰脏脂蛋白酯酶(LPL)、肝脂酶(HL)、总脂酶(TL)及脂肪酶活性;荧光定量PCR测定肝胰脏中LPL基因、HL基因、固醇元件结合蛋白-1c（SREBP-1c）基因、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）基因、脂肪合成酶(FAS)基因表达水平及脾脏、头肾、中肾中HSP70基因表达水平。
　　结果表明:1.在生长方面，与对照组（C组）相比，日粮中添加1.6％OKGM齐口裂腹鱼SGR提高（P＜0.05），FC降低（P＜0.05），添加OKGM及RS对齐口裂腹鱼体长/体高、HSI及CF均影响不显著(P＞0.05)。
　　2.在肌肉品质上，与C组相比，日粮中添加1.6％和3.2％OKGM能提高鱼体肌肉粗蛋白含量(P＜0.05)，降低肝胰脏粗脂肪含量，肌肉粗脂肪、水分、灰分、氨基酸总量、必需氨基酸含量、鲜味氨基酸含量及味觉强度感应影响均不显著（P＞0.05）;日粮中添加RS4降低肝胰脏粗脂肪含量（P＜0.05），肌肉粗脂肪、水分、粗蛋白、灰分、氨基酸总量、必需氨基酸含量、鲜味氨基酸含量及味觉强度感应差异均不显著(P＞0.05)。
　　3.在肝胰脏脂肪代谢酶方面，与C组相比，日粮中添加1.6％OKGM能提高齐口裂腹鱼肝胰脏LPL、HL、TL及脂肪酶活性。
　　4.在脂质代谢相关基因及HSP70基因表达方面，日粮中添加0.8％和1.6％OKGM能上调齐口裂腹鱼肝胰脏LPL mRNA、HLmRNA表达水平（P＜0.05），下调肝胰脏G6PD mRNA表达水平，下调脾脏、头肾、中肾中HS70mRNA表达水平（P＜0.05）;日粮中添加RS能上调肝胰脏HLmRNA表达水平(P＜0.05)，下调脾脏、头肾、中肾HSP70mRNA表达水平。
　　结论:日粮中添加1.6％OKGM有利于齐口裂腹鱼生长，降低饵料系数，提高肌肉粗蛋白含量，降低肝胰脏粗脂肪含量，提高肝胰脏脂肪代谢酶活性及脂酶表达水平，下调肝胰脏G6PD基因表达，下调脾脏、头肾及中肾HSP70基因表达水平，因此，日粮中添加1.6％OKGM能促进齐口裂腹鱼生长，提高肝胰脏脂肪代谢酶活性及LPL、HL基因表达水平，下调G6PD基因及HSP70基因表达水平。

目录

声明

摘要

符号说明

1 文献综述

1．1 多糖的概述

1．1．1 多糖对鱼类生长性能的影响

1．1．2 多糖对鱼类肌肉品质的影响

1．1．3 多糖对鱼类脂质代谢的影响

1．2 魔芋葡甘露聚糖及抗性淀粉研究

1．2．1 魔芋葡甘露聚糖及抗性淀粉概述

1．2．2 魔芋葡甘露聚糖生理功能

1．2．3 抗性淀粉生理功能

1．3 鱼类脂质代谢相关基因研究

1．3．1 SREBP-1c、FAS、G6PD基因的研究

1．3．2 鱼类LPL、HL研究

1．4 鱼类免疫基因HS7D的研究

1．4．1 HSP70结构与功能

1．4．2 鱼类HSP70的研究

1．5 试验目的与意义

1．6 试验内容

1．7 实验技术路线

2 材料与方法

2．1 实验材料

2．1．1 试验动物

2．1．2 主要试剂与药品

2．1．3 主要仪器

2．2 试验方法

2．2．1 氧化魔芋葡甘露聚糖及抗性淀粉的制备

2．2．2 试验分组

2．2．3 生长性能指标测定

2．2．4 样品的采集和制备

2．2．5 肌肉和肝胰脏基本营养成分的测定

2．2．6 肌肉氨基酸的测定

2．2．7 肌肉基于电子舌味觉的测定

2．2．8 肝胰脏脂肪代谢酶活性测定

2．2．9 脂质代谢相关基因及HSP70基因相对定量的分析

2．3 数据处理

3 结果分析

3．1 日粮OKGM及抗性淀粉对齐口裂腹鱼生长性能的影响

3．1．1 日粮OKGM及抗性淀粉对齐口裂腹鱼生长的影响

3．1．2 日粮OKGM及抗性淀粉对齐口裂腹鱼形体指标及内脏指数的影响

3．2 日粮OKGM及抗性淀粉对齐口裂腹鱼肌肉品质的影响

3．2．1 日粮OKGM及抗性淀粉对齐口裂腹鱼体成分的影响

3．2．2 日粮OKGM及抗性淀粉对齐口裂腹鱼氨基酸的影响

3．2．3 日粮OKGM及抗性淀粉对齐口裂腹鱼基于电子舌味觉的影响

3．3 日粮OKGM及抗性淀粉对齐口裂腹鱼脂质代谢的影响

3．3．1 日粮OKGM及抗性淀粉对齐口裂腹鱼肝胰脏脂肪代谢酶的影响

3．3．2 RNA结果检测及引物特异性检测

3．3．3 日粮OKGM及抗性淀粉对齐口裂腹鱼肝胰脏SREPB-1c、G6PD、FASmRNA的影响

3．3．4 日粮OKGM及抗性淀粉对齐口裂腹鱼肝胰脏LPL及HL的影响

3．4 日粮OKGM及抗性淀粉对齐口裂腹鱼脾脏、头肾、中肾HSP70mRNA的影响

4 讨论

4．1 两种多糖对齐口裂腹鱼生长性能的影响

4．2 两种多糖对齐口裂腹鱼肌肉品质的影响

4．2．1 两种多糖对齐口裂腹鱼基本营养成分的影响

4．2．2 两种多糖对齐口裂腹鱼氨基酸和基于电子舌味觉的影响

4．3 两种多糖对齐口裂腹鱼脂质代谢的影响

4．3．1 两种多糖对齐口裂腹鱼肝胰脏脂肪代谢酶活性的影响

4．3．2 两种多糖对齐口裂腹鱼肝胰脏SREBP-1c、FAS、G6PD、LPL和HL基因表达的影响

4．4 两种多糖对齐口裂腹鱼HSP70基因的影响

5 结论与展望

5．1 结论

5．2 展望

参考文献

致谢

攻读学位期间发表的学术论文