抗性淀粉与OKGM降解产物对齐口裂腹鱼营养成分及脂质代谢相关基因表达的影响

摘要

目的:本研究旨在探讨柠檬酸抗性淀粉（Citric acid-modified resistent starch，CARS）与部分降解的氧化魔芋葡甘聚糖（Partially Hydrolyzed Oxidized Konjacglucomannan, PHOKGM）两种不同类型多糖对齐口裂腹鱼（Schizothorax prenantiTchang，SPT）生长、鱼肉营养成分、脂质代谢及其相关基因表达量的影响，评价其功能性作用，为CARS与PHOKGM在SPT养殖过程中的应用提供理论依据。
　　方法:以添加4.6％淀粉为对照组(CK)，CARS分别以3.2％和1.6％等量替换对照组中4.6％的淀粉为试验组，PHOKGM则以3.2％、1.6％、0.8％等量替换对照组中4.6％的淀粉为试验组，分别为H-CARS、L-CARS、H-PHOKGM、M-PHOKGM、L-PHOKGM，饲喂60d后，解剖取样，参考国家标准测定肌肉中的常规组成，使用氨基酸自动分析仪测定肌肉中氨基酸组成;取血清，使用南京建成生产的试剂盒，通过紫外可见分光光度计测定血清中GLU、TC、TG、HDL-C、LDL-C等指标;利用实时定量荧光PCR技术，检测SPT肝脏、肌肉、肠道组织中脂质代谢相关基因(如PPARs、PGC-1α、H-FABP、GPDH、Grelin)的相对表达量水平。
　　结果:1.两种多糖对SPT肝体指数、肥满度、腹腔脂肪指数均没有显著性的影响(p＞0.05)，能不同程度增加SPT增重率、及饲料效率，L-PHOKGM增加效果显著高于其他四个剂量组(p＜0.05);
　　2.两种多糖对SPT腹肌组成及背肌水分、灰分含量均没有显著影响(p＞0.05)，但CARS可略微降低齐口裂腹鱼背肌脂肪沉积(p＞0.05)，而PHOKGM则不同程度增加背肌脂肪沉积，L-PHOKGM增加显著(p＜0.05)，L-PHOKGM略增加背肌中的蛋白含量(p＞0.05);
　　3.两种多糖对SPT背肌与腹肌中的氨基酸们组成没有影响，且背肌与腹肌中的氨基酸组成及含量也没有太大差异，必需氨基酸百分比含量约为42％，鲜味氨基酸百分比含量约为39％，经过化学评分与氨基酸评分，确定SPT肌肉中第一限制性氨基酸为蛋氨酸;
　　4.PHOKGM与L-CARS显著增加血清中HDL-C含量(p＜0.05);添加高剂量两种多糖显著降低血清中TG、TC含量(p＜0.05)，且H-PHOKGM还显著降低LDL-C水平，因此H-PHOKGM相比其他组改善血脂的效果更突出;
　　5.CARS除了降低肌肉组织中PPARβ相对表达量(p＜0.05)，对SPT肝脏、肌肉组织中PPARα、PPARβ、PPARγ没有显著性影响(p＞0.05)，而H-PHOKGM及L-PHOKGM相比M-PHOKGM上调PPARα、PPARβ、PPARγP相对表达量更显著;PHOKGM显著降低了肝脏、肌肉组织中PGC-1a相对表达量(p＜0.05)，CARS对其相对表达量影响不显著(p＞0.05);相比M-PHOKGM，H-PHOKGM及L-PHOKGM增加HFABP、GPDH在肝脏、肌肉组织中相对表达量更显著(p＜0.05)，CARS则不同程度降低了其相对表达量;PHOKGM显著增加了肠道组织中Grelin相对表达量(p＜0.05)，CARS对其表达量影响不显著(p＞0.05)，两种多糖对SPT肠道组织中GPDH相对表达量产生了无规律影响。
　　结论:在SPT日粮中添加0.8％PHOKGM，相比其他组能更好促进SPT生长;而添加3.2％PHOKGM相比其他组能更好改善SPT血脂代谢;除了添加0.8％PHOKGM能够促进背肌脂肪沉积，两种多糖对SPT鱼肉营养成分没有明显影响;相比添加1.6％PHOKGM，添加3.2％及0.8％PHOKGM均能上调肝脏、肌肉组织中PPARs、H-FABP、GPDH及肠道组织中Ghrelin基因的表达量，下调PGC-1α表达，而添加CARS除了不同程度下调PPARβ、H-FABP及GPDH相对表达量，对其他基因表达量影响不显著。

目录

声明

摘要

缩略词表

1 文献综述

1．1 多糖的研究

1．1．1 氧化魔芋葡甘露聚糖(OKGM)

1．1．2 柠檬酸抗性淀粉(CARS)

1．2 多糖对齐口裂腹鱼功能性研究

1．3 鱼肉品质的研究

1．4 鱼类血脂代谢研究

1．5 脂质代谢相关基因的研究

1．5．1 过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)

1．5．2 过氧化物酶体增殖物激活受体γ的辅助激活因子1α(PGC-1α)

1．5．3 心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)

1．5．4 甘油3磷酸脱氢酶(GPDH)

1．5．5 饥饿素(Ghrelin)

1．6 试验的目的及意义

2 材料与方法

2．1 实验材料与设备

2．1．1 试验用鱼

2．1．2 试验原料

2．1．3 实验试剂

2．1．4 试验仪器设备

2．2 试验方法

2．2．1 多糖的制备

2．2．2 动物的饲养

2．2．3 试验动物生长性能指标的测定

2．2．4 样品的采集制各

2．2．5 鱼肉营养成分的测定

2．2．6 脂质代谢相关指标的测定

2．2．7 RNA的提取与cDNA制备

2．2．8 荧光定量

2．2．9 数据分析

3 结果与分析

3．1 两种多糖对SPT生长性能影响的结果分析

3．2 两种多糖对SPT鱼肉品质影响的结果分析

3．2．1 两种多糖对SPT肌肉组成的影响结果

3．2．2 两种多糖对SPT肌肉氨基酸组成的影响结果

3．2．3 两种多糖对SPT肉质性状的影响结果

3．3 两种多糖对SPT血脂代谢指标影响的结果分析

3．4 两种多糖对SPT脂质代谢相关基因相对表达量的影响

3．4．1 RNA提取及引物特异性检测

3．4．2 基因扩增曲线、溶解曲线及溶解峰

3．4．3 两种多糖对PPARs相对表达量的影响结果

3．4．4 两种多糖对SPT组织中PGC-1α相对表达量影响

3．4．5 两种多糖对SPT组织中H-FABP相对表达量的影响

3．4．6 两种多糖对SPT组织中GPDH相对表达量影响

3．4．7 两种多糖对SPT肠道中GPDH、Grelin相对表达量的影响

4 讨论

4．1 两种多糖对SPT生长性能的影响

4．2 两种多糖对SPT肌肉组成影响

4．3 两种多糖对脂质代谢相关指标影响

4．4 两种多糖对SPT脂质代谢相关基因表达影响

5 结论与展望

5．1 结论

5．2 展望

参考文献

致谢

攻读学位期间发表的学术论文