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【6h】

轮藻科(Characeae)三个属无丝分裂的研究

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引言

1材料

1.1材料

1.2试剂的配制

2方法

2.1材料的培养

2.2材料的清洗与固定

2.3材料的染色

2.3.1 Giemsa染色法

2.3.2 DAPI荧光法

3结果和分析

3.1结果

3.2分析

3.2.1乳突丽藻

3.2.2钝节拟丽藻

3.2.3弧枝轮藻

4讨论

4.1三个属三种藻的对照讨论

4.1.1节间细胞核分裂情况讨论

4.1.2小枝细胞核分裂情况

4.1.3节部和假根细胞核分裂情况

4.2有关三种藻无丝分裂的情况有所差别的原因

4.3两种实验方法比较

5无丝分裂的生物学意义

参考文献

综述一 无丝分裂简述

综述二 微管的研究简述

致谢

硕士期间发表的学术论文

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摘要

轮藻门分1纲、3目(直立轮藻目、右旋轮藻目、左旋轮藻目),现存仅左旋轮藻目的轮藻科,含6属,约400种,中国已报道的有150多种。本文选取轮藻科(Characeae)3个属的轮藻植物:丽藻属的乳突丽藻(Nitella papillata)、拟丽藻属的钝节拟丽藻(Nitellopsis obtusa)和轮藻属的弧枝轮藻(Chara connivens)进行细胞核无丝分裂的观察。 取自然光室温条件下用自来水培养的三种藻的节部、小枝细胞、节间细胞和假根,刷洗干净后用卡诺固定液室温下固定至藻体叶绿素褪去,分别用Giemsa常规染色法和DAPI (4',6-diamidino-2'-phenylindole)荧光染色法进行实验。三种藻由于构造上有所不同,乳突丽藻表面有胶质,钝节拟丽藻表面钙质多,而弧枝轮藻具皮层且多钙,所以用Giemsa常规染色法对它们进行研究的步骤有所不同,经过多次试验,找到了合适的方法。另外,弧枝轮藻节间细胞由于包裹有皮层细胞,用此法研究较难。三种藻用DAPI荧光染色法进行实验,步骤相同,观察很方便,弧枝轮藻节间细胞可把表面皮层细胞剥离后观察。DAPI荧光染色法进行观察时可统计细胞核分裂情况,并作相应的分析。实验结果显示,三种藻不同生长时期、不同生长部位的藻体细胞其分裂方式均为无丝分裂,未发现有丝分裂。藻体细胞多为多核,也有节间细胞为单核或双核,细胞核形态各异,大小不同。假根类似高等植物的须根,除靠近茎的假根细胞和节部细胞核形态较规则外,其他地方细胞核形态大小不规则。在细胞核无丝分裂过程中,染色质不发生浓缩,核膜不解体,核的分裂部位不固定,产生的子核大小不等,形态多样,与之前本课题组对钝节拟丽藻的初步研究结果一致。三种藻无丝分裂情况的观察及统计显示,同种藻各部位及不同中藻相同部位无丝分裂情况有所差别,特别是钝节拟丽藻节部细胞发现有单核和双核存在,并且有缢裂和劈裂发生,而其他两种藻节细胞均为单核,也未观察到无丝分裂现象;三种藻假根节部细胞均为单核,也只有钝节拟丽藻假根节部有不规则劈裂现象:所以,钝节拟丽藻节部细胞和假根节部细胞与其他两种藻有明显不同。有关三种藻无丝分裂情况有所差异的原因可能与细胞内的某些因素有关。另外两个特异之处是:一,与茎靠近的假根中的核圆形并且规则,而在其他地方的假根中的核则完全不规则,与茎靠近的假根可能由埋入黄泥中的茎转变而来,其细胞核基本维持了原有的形态,而新生的假根中则产生了不规则的核,有关原因及机制有待深入研究;二,在大小相当的节间细胞和皮层细胞中,正在分裂的细胞核的数量与细胞核总数几乎呈负相关,推测一定长度的藻体细胞有保持细胞内核的总数量的能力,表明轮藻细胞具有特定的生理现象。

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