声明
前言
第一章盐生杜氏藻Dscbr基因的表达调控
1.材料和方法
1.1材料
1.2方法
2.结果与分析
2.1盐生杜氏藻总RNA的质量
2.2引物的各项参数
2.3实时荧光定量PCR反应体系及引物特异性验证
2.4实时荧光定量PCR标准曲线
2.5样品检测的实时荧光定量PCR结果
2.6实时荧光定量PCR的结果
3.讨论
3.1光强对盐藻Dscbr基因的转录调控
3 2盐震扰对盐藻Dscbr基因的转录调控
3.3实时荧光定量PCR
4.小结
参考文献
第二章盐生杜氏藻Dscbr基因农杆菌表达载体构建及转化拟南芥
1.材料和方法
1.1材料
1.2方法
2.结果与分析
2.1 ORF序列的扩增
2.2 TA克隆和测序
2.3构建表达载体pBI121-Dscbr
2.4根癌农杆菌的转化
2.5花序浸染法转化拟南芥
2.6拟南芥无菌苗的生长
3.讨论
3.1 pBI121植物表达载体的选择和构建
3.2花序浸染法的优缺点及应用
4.小结
参考文献
第三章转Dscbr基因拟南芥的筛选鉴定与功能互补分析
1.材料和方法
1.1材料
1.2方法
2.结果
2.1抗性转基因植株的获得
2.2抗性植株的移栽
2.3转基因植株的PCR检测
2.4转基因拟南芥的表型分析
3.讨论
3.1转Dscbr基因拟南芥的功能分析
3.2转基因植物的PCR检测
4.小结
参考文献
第四章盐生杜氏藻Dscbr基因的原核表达及其蛋白纯化
1.材料与方法
1.1材料
1.2方法
2.结果与分析
2.1引物参数
2.2 ORF序列的扩增
2.3构建重组表达载体
2.4 DsCBR融合蛋白的诱导表达
2.5融合蛋白的表达条件优化
2.6重组蛋白的纯化
3.讨论
3.1 Dscbr表达载体和酶切位点的选择
3.2 DsCBR蛋白可溶性表达的优化
3.3 SDS-PAGE蛋白质凝胶电泳
3.4透析袋电洗脱法纯化DsCBR蛋白
4.小结
参考文献
第五章盐藻DsCBR蛋白与光合色素的体外重组
1.材料与方法
1.1材料
1.2方法
2.结果与分析
2.1 DsCBR蛋白含量的测定
2.2盐藻色素的提取
2.3 DsCBR蛋白与色素的体外重组
2.4重组复合体的光谱分析
3.讨论
3.1色素提取
3.2 DsCBR蛋白与光合色素的体外重组
3.3 CBR/ELIP的光保护功能机制
4.小结
参考文献
结论
作者在读期间科研成果简介
致谢
综述:光胁迫相关蛋白ELIPs/CBR的研究进展
1.ELIPs/CBR的概况
1.1 ELIPs的发现
1.2 ELIP亚家族:原核和真核生物的ELIP-like蛋白
1.3 ELIPs/CBR的结构特点
1.4 ELIPs相关蛋白的分子进化模型
2.表达调控
2.1光受体
2.2转录调节
2.3翻译后调节
3.ELIPs的功能及机制
3.1 ELIPs的光保护功能
3.2 ELIPs的光保护机制——“色素载体”蛋白
4.光合生物的光保护机制
4.1类胡萝卜素的光保护机制
4.2与叶黄素循环有关的非光化学电子激发态淬灭机制
5.捕光色素蛋白复合体(LHC)
5.1 LHCII的组成
5.2结构特点
5.3主要功能
5.4色素蛋白复合物的多样性
参考文献