马勃多糖的分离纯化与基本结构研究

摘要

本文以药用植物马勃为研究对象，研究其多糖的提取、分离纯化、结构以及理化性质，为揭示马勃多糖的结构与活性的关系，进一步开发利用此类资源初步奠定了基础。主要研究内容与结论如下：马勃经热水浸提，用Sevage法脱蛋白，乙醇沉淀，得到马勃粗多糖。粗多糖经DEAE-sepharose fast flow离子交换层析和Sephacryl S-300 HR凝胶层析进一步纯化得到三个主要多糖组分：CGP Ⅰ-1，CGP-Ⅱ，CGP-Ⅲ。三种多糖分别经Sephacryl S-300 HR凝胶层析检测显示单一对称峰，琼脂糖电泳呈现单一斑点，紫外260nm，280nm扫描没有吸收峰，证明三种多糖为不含蛋白、核酸的均一组分。通过Sephacryl S-300 HR凝胶层析测定CGP Ⅰ-1，CGP-Ⅱ，CGP-Ⅲ的表观分子质量分别为9.12×10<'4>Dal，18.6×10<'4>Dal，15.6×10<'4>Dal：纸层析和GC-MS分析三种多糖中的单糖组成和摩尔比，研究发现CGP Ⅰ-1含有甘露糖、葡萄糖、半乳糖，其摩尔比为1.22：11.28：3.92：CGP-Ⅱ含有甘露糖、葡萄糖和半乳糖，其摩尔比为1.74：26.45：0.36，CGP-Ⅲ含有甘露糖、葡萄糖、半乳糖，其摩尔比1.06：9.9：3.29.<'13>CNMR图谱和咔唑-硫酸法研究均表明CGP-Ⅱ，CGP-Ⅲ中含有糖醛酸，用咔唑-硫酸法测得CGP-Ⅱ，CGP-Ⅲ中的糖醛酸含量分别为17.2％和20.5％。三种多糖的紫外光谱显示，它们的最大紫外吸收峰具有随糖浓度的降低向低波长漂移的现象。红外光谱显示，在1420 cm<'-1>，2920 cm<'-1>，3400 cm<'-1>左右均具有多糖的特征吸收峰。三种多糖均为吡喃糖，通过对核磁共振图谱的解析进一步证实的CGP I-1为多不含糖醛酸的中性多糖，同时具有α、β两种键型。而CGP-Ⅱ，CGP-Ⅲ则以β型差向异构为主，由高碘酸氧化和Smith降解得知CGP Ⅰ-1中存在大量的1→6、1→键型，且与1→4/1→4，6键的摩尔比为7.8：5.5，CGP-Ⅱ中1→6，1→，和1→4/1→4，6键，摩尔比为7.4：7.9。CGP-Ⅲ中其摩尔比为8.4：9.3。三种多糖主链中都存在不被高碘酸氧化的Glc(1→3)键型。通过原子力显微镜对CGP Ⅰ-1的分子形貌观察，发现其为高度分支结构，高浓度时易形成强大的网络结构。

目录

声明

综述

1马勃研究概况

2生物活性多糖研究概况

参考文献

摘要

第一部分马勃多糖的分离与纯化

1引言

2材料、试剂与仪器

3方法

4结果与讨论

参考文献

附录

第二部分马勃多糖理化性质的研究

1引言

2材料、试剂与仪器

3方法

4结果与讨论

参考文献

附录

第三部分马勃多糖基本结构分析

1引言

2材料、试剂与仪器

3方法

4结果与讨论

参考文献

第四部分讨论与展望

1讨论

2展望

致谢

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