内皮素对黑素细胞功能调节机制研究及其在美白化妆品开发中应用

摘要

内皮素(endothelin,ET)是一组21个氨基酸组成的多肽,有3种同分异构体:ET-1、ET-2和ET-3,ET-1被认为是三者中生物学作用最强的一种.ET通过细胞膜上的特异性受体发挥作用,已经发现的有ET<,A>和ET<,B>两种,人类黑素细胞上ET<,A>和ET<,B>均存在.在外界环境有害因素(如紫外线照射)作用下,皮肤表皮角朊细胞可以产生ET-1,促进黑素细胞的增殖和黑素合成.ET-1已经是公认的、对黑素细胞代谢调节起重要影响作用的因素之一.该文采用膜片箝技术、微荧光成像技术(Fura-2/AM为探针),研究了ET-1对人黑素细胞和B16细胞电生理特征、细胞内Ca<'2+>水平影响,并将微荧光成像技术作为一种筛选平台应用到美白祛斑化妆品添加剂研发,同时建立了以筛选美白祛斑化妆品添加剂为目的的基础平台.

目录

前言

第一部分、ET-1对黑素细胞功能调节机制研究

一、材料与方法

(一)、实验材料、仪器设备

(二)、细胞培养

(三)、黑素细胞增殖实验

(四)、黑素细胞内游离Ca2+浓度测定

(五)、黑素细胞膜离子通道电流测定

(六)、细胞迁移实验

二、结果

(一)、人正常黑素细胞的纯培养

(二)、ET-1对人正常黑素细胞形态影响

(三)、ET-1人正常黑素细胞增殖影响

(四)、ET-1对人正常黑素细胞内Ca2+浓度影响

(五)、ET-1对黑素细胞膜电压依赖性外向K+电流的影响

(六)、ET-1对B16细胞迁移功能的影响

三、讨论

第二部分、美白祛斑化妆品添加剂筛选平台的建立及应用

第一节、美白祛斑化妆品添加剂基础筛选平台建立及对部分添加剂效果检验

一、材料与方法

二、结果

三、讨论

第二节、显微荧光成像技术在美白祛斑化妆品添加剂筛选中的应用——川芎嗪对ET-1诱导黑素细胞内Ca2+浓度增加拮抗作用研究

一、材料与方法

二、结果

三、讨论

参考文献

致谢

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