两种红豆杉植物愈伤组织培养、褐化抑制及紫杉醇含量检测

摘要

曼地亚红豆杉(Taxusmedia)和南方红豆杉(Taxuschinensisvar．marei)都是提取抗癌药品紫杉醇的重要来源，同时也是优秀的园林绿化树种，其中南方红豆杉是我国特有物种。目前，针对这两种植物的组织培养研究还相对薄弱。本文选取曼地亚红豆杉和南方红豆杉植株，对其愈伤组织诱导和培养条件进行研究，对组织培养中的褐化抑制方法进行了探讨，并对枝叶中紫杉醇含量进行了测定和比较，提出了较为完整的曼地亚红豆杉和南方红豆杉愈伤组织诱导、培养和褐化抑制技术体系，并以此为基础，对两种红豆杉组织培养研究主要问题和前景进行了探讨和展望。 基于DPS数据处理系统对愈伤组织诱导实验框架的均匀设计，本文首先对两种红豆杉的愈伤组织诱导和培养进行了研究，重点是对茎和叶外植体的诱导能力分析比较、植物生长调节剂的选取、浓度配比优化；对两种红豆杉愈伤组织诱导能力从三个方面进行了对比研究。结果表明：两种红豆杉用于愈伤组织诱导的最佳外植体均为茎；B5+NAA2．9mg／L+6-BA0．3mg／L最适合曼地亚红豆杉愈伤组织诱导和培养，B5+NAA1．7mg／L+6-BAO．1mg／L最适合南方红豆杉愈伤组织诱导和培养；南方红豆杉外植体成愈时间较曼地亚红豆杉小、愈伤组织直径较曼地亚红豆杉大，曼地亚红豆杉愈伤组织诱导率较南方红豆杉高，整体来看，南方红豆杉更易于进行愈伤组织诱导和培养。 其次，本文对利用植物材料避光处理、向培养基中添加活性炭、抗坏血酸以及上述方法复合使用抑制两种红豆杉愈伤组织培养不同阶段中产生的褐化现象进行了探讨。结果表明：在愈伤组织诱导阶段，植物材料避光处理、向培养基中添加活性炭和抗坏血酸都能对愈伤组织褐化起到不同程度的抑制作用，而添加抗坏血酸0.1g／L时对两种红豆杉褐化抑制效果均最佳；在愈伤组织增殖阶段，向培养基中添加抗坏血酸能有效的对褐化起到抑制作用，浓度为0．01-O.1g／L时对曼地亚红豆杉效果最佳，浓度为0.01-0.2g／L时对南方红豆杉效果最佳。 最后，本文对两种红豆杉枝叶中紫杉醇含量进行了检测和对比。结果表明：曼地亚红豆杉枝叶中紫杉醇含量为0．0105％，而南方红豆杉枝叶中紫杉醇则没有检出。在此基础上，对目前紫杉醇提取、检测以及不同种红豆杉紫杉醇含量果进行了初步分析和讨论。 本文的研究对于曼地亚红豆杉、南方红豆杉和其他红豆杉物种组织培养工作，以及紫杉醇提取、检测工作具有一定的指导意义。

目录

摘要

第一章引言

第二章红豆杉属植物组织培养和紫杉醇开发研究进展

第三章两种红豆杉植物愈伤组织诱导和培养

第四章两种红豆杉植物的愈伤组织的褐化抑制

第五章红豆杉枝叶中紫杉醇含量检测与分析

第六章结论与展望

参考文献

致谢

附图

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