表皮葡萄球菌生物膜三维结构、相关形成机制及组氨酸激酶YycG小分子抑制物的研究

摘要

本文对表皮葡萄球菌生物膜三维结构、相关形成机制及组氨酸激酶YycG小分子抑制物进行了研究。文章分为三个部分： 第一章建立了 flow-chamber和static-chamber观察表皮葡萄球菌生物膜的体外培养系统。利用这些体外培养系统可以实时观察表皮葡萄球菌生物膜的形成过程，经各种不同荧光染料的染色后可以在激光共聚焦显微镜下清晰的观察生物膜的形态结构及内部细菌的生理状态。 第二章胞外DNA作为生物膜基质的主要成分已被证明在很多细菌的生物膜形成中发挥着重要的作用，但其在表皮葡萄球菌生物膜中的存在及具体作用不得而知。DNA 酶处理发现能抑制表皮葡萄球菌实验室标准株和临床株生物膜的形成，但成熟的生物膜可以抵抗这种作用，进一步的研究发现DNase I可以明显抑制表皮葡萄球菌的初始黏附，这些结果均说明胞外DNA参与表皮葡萄球菌生物膜形成且与细菌的初始黏附密切相关。 第三章运用生物信息学分析在表皮葡萄球菌全基因组中共发现了16 对双组分信号转导系统，功能分析预测发现大部分双组分信号转导系统参与调控细菌离子交换、外蛋白分泌、黏附和自溶等重要的生理功能，其中有两对双组分信号转导系统 YycG/YycF和YhcS/YhcR调控细菌生长。

目录

声明

前言

第一章表皮葡萄球菌生物膜三维结构体外观察模型的建立及临床株生物膜的研究

第一节表皮葡萄球菌生物膜三维结构体外观察模型的建立

材料与方法

结果

讨论

第二节表皮葡萄球菌ica-/BF+临床株生物膜结构特性的研究

材料与方法

结果

讨论

第三节表皮葡萄球菌ica+/BF+临床株生物膜结构特性的研究

材料与方法

结果

讨论

小结

第二章胞外DNA在表皮葡萄球菌生物膜形成中的作用

材料与方法

结果

讨论

小结

第三章表皮葡萄球菌组氨酸激酶YycG小分子抑制物的筛选及其活性的研究

第一节表皮葡萄球菌YycG/YycF双组分信号转导系统的生物信息学的分析

材料与方法

结果

讨论

第二节表皮葡萄球菌YycG小分子抑制物的筛选及生物学活性验证

材料与方法

结果

讨论

第三节YycG小分子抑制物对生物膜内表皮葡萄球菌的杀伤作用

材料与方法

结果

讨论

小结

总结

参考文献

附录

致谢